HPLC乙腈洗脱的样品对SDS-PAGE有影响吗
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/26 15:10:53
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实质是乙腈对该实验是否有影响.
度娘的提示:SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白分子的二、三级结构.而强还原剂如巯基乙醇,二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂.在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成多肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白- SDS胶束,所带的负电荷大大超过了蛋白原有的电荷量,这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异.
所以就怕少量的乙腈影响到sds与蛋白结合.
不过可以用未用乙腈洗脱的和乙腈洗脱过的跑个胶看是否不同就可以验证了
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