为什么挑的单克隆在LB培养基中培养了快12个小时,菌液还是那么少,浓度不够,不能测序

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 18:40:34
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为什么挑的单克隆在LB培养基中培养了快12个小时,菌液还是那么少,浓度不够,不能测序
可能挑的单克隆活性不高,也有可能是没挑到.
我觉得更像是前一种可能.
你可以从一下几个方面思考:
1 是否菌液中抗生素浓度加的过高?
2 是否培养时间不够?
(因为我们培养常常要超过20个小时,在高浓度抗生素平板上长出菌不容易啊!)
3 是否导入质粒失败?
也可能跟你转化的质粒有关.有些质粒转化后转化子是长的很慢的,如BT340,需30度培养2天才能长出直径1mm左右的转化子.
我觉得可以适当提高平板培养时的温度,我一般都是37度培养,12-16个小时就长出来了,如果超过24小时,就有可能长没有转化的菌落了.
另外有一点需要注意的就是有可能因为抗生素浓度施加过高导致菌体增殖受阻.

可能跟你转化的质粒有关。有些质粒转化后转化子是长的很慢的,如BT340,需30度培养2天才能长出直径1mm左右的转化子。
我觉得可以适当提高平板培养时的温度,我一般都是37度培养,12-16个小时就长出来了,如果超过24小时,就有可能长没有转化的菌落了。
另外有一点需要注意的就是有可能因为抗生素浓度施加过高导致菌体增殖受阻。...

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可能跟你转化的质粒有关。有些质粒转化后转化子是长的很慢的,如BT340,需30度培养2天才能长出直径1mm左右的转化子。
我觉得可以适当提高平板培养时的温度,我一般都是37度培养,12-16个小时就长出来了,如果超过24小时,就有可能长没有转化的菌落了。
另外有一点需要注意的就是有可能因为抗生素浓度施加过高导致菌体增殖受阻。

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可能挑的单克隆活性不高,也有可能是没挑到。
我觉得更像是前一种可能。
你可以从一下几个方面思考:
1 是否菌液中抗生素浓度加的过高?
2 是否培养时间不够?
(因为我们培养常常要超过20个小时,在高浓度抗生素平板上长出菌不容易啊!)
3 是否导入质粒失败?
这是我所想到的,希望对你有帮助。...

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可能挑的单克隆活性不高,也有可能是没挑到。
我觉得更像是前一种可能。
你可以从一下几个方面思考:
1 是否菌液中抗生素浓度加的过高?
2 是否培养时间不够?
(因为我们培养常常要超过20个小时,在高浓度抗生素平板上长出菌不容易啊!)
3 是否导入质粒失败?
这是我所想到的,希望对你有帮助。

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为什么挑的单克隆在LB培养基中培养了快12个小时,菌液还是那么少,浓度不够,不能测序 转化子为什么在LB液体培养基上培养不出来用PBI121与我的目的片断酶切连接构建植物表达载体,连接后使用DH5α做的感受态转化,长出转化子,但是挑单克隆到具相应抗性的LB液体培养基上培养却 LB中加抗生素卡那霉素的作用LB培养基是用来培养农杆菌的 为什么枯草杆菌要用bl培养基培养上面写错了 是lb培养基 培养大肠杆菌等细菌常用的培养基之一LB培养基其组成是:胰蛋白胨1%,酵母膏0.5%,NaCl1%,试从微生物对营养要求的角度分析为什么细菌能在该培养基上生长? 为什么黏细菌不能在LB培养基中生长? 在含卡那的培养板和培养基中都长,菌液PCR也有,就是提不出来质粒用pET30a构建原核表达载体,连接产物转化,长了满板,条单克隆到含卡那的液体培养基中,长了,菌液PCR有条带,但提质粒提不出来 病毒可不可以在营养丰富的培养基中培养?为什么? LB培养基如何配制?LB培养基在与其他培养基的比较,注重哪一方面?比较适合哪种植物的培养 为什么拿到菌液以后还要在LB液体培养基上培养?其目的是什么? 96孔细菌培养板怎么洗LB培养基残留在孔里了. 关于LB固体培养基昨天倒平板,在LB培养基中添加amp,100mg/ml的amp母液,LB培养基为1000ml,应该加入1ml amp,但我一时疏忽只加了0.1ml amp,怎么补救? 为什么LB固体培养基的面是斜的? 在培养细菌的培养基中,偶然混入了青霉素,为什么在它的周围没有产生细胞生长? 将质粒导入感受态细胞、再转入含Amp的LB固体培养基中培养,这个培养时间是多少?已经培养17小时了,可是,没有菌生长,原因是什么? 细菌传代培养我的菌在液体摇瓶培养了4天后再传代,为什么在新的培养基中没生长? 如何培养出农杆菌的单菌落看文献说农杆菌培养在28℃,3天才能长出单菌落.为什么我培养的农杆菌同样温度下22h就已经连成片了.我用的是LB培养基含壮观霉素100mg/L,菌株为EHA105.我直接从-80℃ 农杆菌的培养中用LB培养基好还是YEP培养基,它们有什么区别