请问,荧光定量PCR的两个曲线感觉都是正常的,怎么跑SDS-page胶却出现双带呢?而荧光曲线不正常跑胶却正常我用Trizol和氯仿手提人血清miRNA先反转,然后做Realtime PCR..然后跑2%的DNA胶.目的DNA长度大
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/18 14:52:07
请问,荧光定量PCR的两个曲线感觉都是正常的,怎么跑SDS-page胶却出现双带呢?而荧光曲线不正常跑胶却正常我用Trizol和氯仿手提人血清miRNA先反转,然后做RealtimePCR..然后跑2
请问,荧光定量PCR的两个曲线感觉都是正常的,怎么跑SDS-page胶却出现双带呢?而荧光曲线不正常跑胶却正常我用Trizol和氯仿手提人血清miRNA先反转,然后做Realtime PCR..然后跑2%的DNA胶.目的DNA长度大
请问,荧光定量PCR的两个曲线感觉都是正常的,怎么跑SDS-page胶却出现双带呢?而荧光曲线不正常跑胶却正常
我用Trizol和氯仿手提人血清miRNA先反转,然后做Realtime PCR..然后跑2%的DNA胶.目的DNA长度大概是20~50bp.有什么可能的原因吗?
请问,荧光定量PCR的两个曲线感觉都是正常的,怎么跑SDS-page胶却出现双带呢?而荧光曲线不正常跑胶却正常我用Trizol和氯仿手提人血清miRNA先反转,然后做Realtime PCR..然后跑2%的DNA胶.目的DNA长度大
一楼没有做过 miRNA,先不要理他.
楼主的做法我并没有做过,因为我使用的是Tagman试剂盒带有特异性探针,所以并无特异性问题.
我理解楼主的意思是：
1505及1489曲线不正常,1505条带正常,1489条带不正常
659与1491曲线正常,但是两个条带都不正常
我的意见如下：
1.楼主的引物是自己设计的吗?目标只有二十多碱基,哪里来的特异性?
2.楼主的反转用的什么引物?
3.楼主的样本是否含有DNA?有检查过DNA消化干净了吗?
1505那个明显是非特异扩增了，另外目的片段20-50bp这样的话基本上是引物二聚体了，建议设计稍微长点儿的
请问,荧光定量PCR的两个曲线感觉都是正常的,怎么跑SDS-page胶却出现双带呢?而荧光曲线不正常跑胶却正常我用Trizol和氯仿手提人血清miRNA先反转,然后做Realtime PCR..然后跑2%的DNA胶.目的DNA长度大
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