realtime ）就是想做个梯度稀释的cDNA的标准曲线,请问我应该怎么做,我用的是Roche的荧光定量PCR仪,请问我是选相对定量还是绝对定量做曲线啊?

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2024/11/25 06:29:07

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realtime ）就是想做个梯度稀释的cDNA的标准曲线,请问我应该怎么做,我用的是Roche的荧光定量PCR仪,请问我是选相对定量还是绝对定量做曲线啊?
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就是想做个梯度稀释的cDNA的标准曲线,请问我应该怎么做,我用的是Roche的荧光定量PCR仪,请问我是选相对定量还是绝对定量做曲线啊?

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博凌科为-为你相对定量还是绝对定量,这要看你的实验目的,如果你只关心某一基因的相对表达量,举例来说,如桃果实,当你采收后,很易变软,那我现用一种药剂处理一下,使它变软的速度慢一些或不变软,这就出现了对照和处理,如果你只想知道桃果实软化相关的某一基因在处理后的表达较对照降低或增加了几倍,那只需做相对定量就可以了.至于绝对定量而言,也举个例子吧,医生对一个病人的每毫升血液中有到底有多少病毒颗粒感兴趣,这是就要做绝对定量了.绝对定量中必须要用到标准曲线,且其标准品浓度已知,并要求相当精确.相对定量也可以用标准曲线,其目的是计算扩增效率,也可以不用,通过扩增曲线求扩增效率.你要是想做梯度稀释的cDNA样品的标准曲线,这个容易,但我建议你买个EasyDilution,Takara有卖,这个有助于你在稀释样品时不会因粘在枪头上而带来过多的误差.操作如下：1、准备直接反转录的cDNA样品8ul；2、转移到另一新离心管中再加8ulEasyDilution,混均；3、从2中再取8ul放到另一管中,再加8ulEasyDilution,混均；4、重复步骤3,共有5个点就可以了.上述是按2倍的梯度来稀释的,这要看你研究的基因表达丰度,若很高你也可按10倍的梯度来做.不知我的解释是否能让你明白.

realtime ）就是想做个梯度稀释的cDNA的标准曲线,请问我应该怎么做,我用的是Roche的荧光定量PCR仪,请问我是选相对定量还是绝对定量做曲线啊? 什么是梯度稀释? 在浓度稀释中,倍数法稀释与梯度法稀释的结果有什么不同? 做elisa的时候,阴性对照也要做梯度稀释吗什么是realtime PCR,什么是q-pcr,所用反应物质与普通PCR有何不同稍微详细点,最好附加点做的注意事项.查查百度百科什么的,我也会.另外RealTime-q-pcr 是不是就是q-pcr? 环境样品梯度稀释,涂布平板法分离微生物时,如何选择不同稀释梯度样品的涂布顺序?为什么? 一升有细菌的水取一毫升用无菌水稀释后再梯度稀释怎么算原溶液中的细菌分离细菌的梯度稀释法的注意事项有哪些?想到多少说多少.. 做RT-PCR的时候为什么要设置标准反应体系和管家基因反应体系?还有就就是,为什么要制备用于绘制梯度稀释标准曲线的DNA模板?这些步骤在实验中有什么作用? 为什么稀释平板法中,梯度稀释后,还要将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面? 检测食品菌落总数的时候梯度稀释的过程中试管中加入的是什么稀释液? PBS缓冲液我是用于菌悬液的梯度稀释的,然后接到培养基培养,算是细胞培养的范围吗? 梯度pcr的梯度设置作用是什么? 测定水样中的大肠杆菌 MPN 计算取水样进行稀释,稀释后水样为1:1000,以此为样本,然后进行分装和培养（表中梯度和操作稀释度一样）,查表得出MPN/100ml=200.第一,这个200的含义是什么?是不是说稀如何根据水平气压梯度力画地转偏向力（就是知道了水平气压梯度力之后怎么确定地转偏向力或者风向有规定的角度吗?）什么是函数的梯度? 什么是梯度的方向梯度的计算公式