如何实验证明乳糖确实可以诱导半乳糖苷酶的表达呢?课本上说乳糖可以同时诱导β-半乳糖苷酶、通透酶、乙酰基转移酶三种酶的大量表达.但这只是书上这么讲,我们也可以把它想象为乳糖直
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/24 12:48:26
如何实验证明乳糖确实可以诱导半乳糖苷酶的表达呢?课本上说乳糖可以同时诱导β-半乳糖苷酶、通透酶、乙酰基转移酶三种酶的大量表达.但这只是书上这么讲,我们也可以把它想象为乳糖直
如何实验证明乳糖确实可以诱导半乳糖苷酶的表达呢?
课本上说乳糖可以同时诱导β-半乳糖苷酶、通透酶、乙酰基转移酶三种酶的大量表达.
但这只是书上这么讲,我们也可以把它想象为乳糖直接诱导通透酶的大量表达后,细胞内大量涌进乳糖分子,乳糖分子的增多这种信息通过信号传导、级联放大刺激半乳糖苷酶基因的活化并大量表达.
但是如何用实验方法直接证明经典的说法是对的呢?
当然要求说法严格的话,也可以把上述提问中的“乳糖”改为“异乳糖(alloLactose)”.
如何实验证明乳糖确实可以诱导半乳糖苷酶的表达呢?课本上说乳糖可以同时诱导β-半乳糖苷酶、通透酶、乙酰基转移酶三种酶的大量表达.但这只是书上这么讲,我们也可以把它想象为乳糖直
你提到的问题无非涉及到两个点：
1、两种酶之间是否存在联系（合成方面）2、两种酶的合成是否需要其他蛋白因子（或小分子有机物）的介入.
（一）对于第一个问题很好办,分别用两株菌基因敲除β-半乳糖苷酶、通透酶基因,再检测细胞中是否存在（应该是大量存在）对应的另一种酶.如果存在,则说明两者之间无关系,反之则说明有关系.
（二）对于第二个问题较麻烦.比较笨的方法是先用乳糖诱导一株菌产生上述两种酶,提取菌株的总蛋白,然后用β-半乳糖苷酶、通透酶对应抗体PULL-DOWN去除这两种蛋白后,用剩下的蛋白加入到无乳糖（但含葡萄糖）的启动子-10区的碱基突变株（启动子活性与乳糖操纵子的活性一样高,但是不需要cAMP-CAP的激活,故无乳糖存在时低水平表达,有乳糖存在时表达水平很高）中,检测突变株中β-半乳糖苷酶、通透酶的含量.如果含量很高,则说明是有因子介导的,反之则说明不需因子介导.但这种方案还有很多缺陷,如何向含细胞壁且很小的大肠杆菌中导入这些蛋白因子,并保证这些蛋白质的活性；其次若为小分子有机物,为了排除其中的乳糖的干扰,需要剔除乳糖分子,用乳糖酶消化乳糖后用其对应的抗体剔除乳糖酶蛋白,但需要有一份只加入半乳糖（乳糖分解产生）的对照组.