测定核酸含量的方法有哪些?

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2024/11/05 20:37:15

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测定核酸含量的方法有哪些?
测定核酸含量的方法有哪些?

测定核酸含量的方法有哪些?
核酸中的有机无机磷酸——→无机磷酸+钼酸——→磷钼酸+还原剂（抗坏血酸等）——→钼兰
钼兰的最大吸收波长在660nm,在一定浓度范围内,溶液的吸收值与无机磷的含量成正比.该法测得的是总磷量,需减去无机磷的含量才是核酸的含磷量.
（二）定糖法
核酸中的戊糖可在浓盐酸或浓硫酸作用下脱水生成醛类化合物,醛类化合物可与某些成色剂缩合成有色化合物,可用比色法或分光光度法测定其溶液中的吸收值,在一定浓度范围内,溶液的吸收值与核酸的含量成正比.
1、核糖的测定
生成的绿色化合物在λ=670nm处有最大的吸收值.
2、脱氧核糖的测定
DNA中的脱氧核糖可在浓硫酸作用下脱水生成ω-羟基-γ-酮戊酸,该化合物可与二苯胺生成兰色化合物,在λ=595nm处有最大吸收值.
（三）紫外吸收法
根据核酸分子中的嘌呤环和嘧啶环在λ=260nm处有最大吸收值,可采用紫外分光光度法测定核酸的含量.

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