PCR体系怎么配在PCR体系中,有的10taq buffer中含有镁离子,有的没有,有镁离子和没有镁离子我该怎么配体系啊,有了的话是不是不用另外加镁离子然后多加点超纯水就可以了啊
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/17 08:26:56
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PCR体系怎么配
在PCR体系中,有的10taq buffer中含有镁离子,有的没有,有镁离子和没有镁离子我该怎么配体系啊,有了的话是不是不用另外加镁离子然后多加点超纯水就可以了啊
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Mg2+ 的终浓度是 1.3 mmol/L（nmol/μL）
你自己根据需要的总体计算一下就行了.
一般的PCR检测我推荐2mM终浓度,长片段PCR检测用3mM效果更好.如果是高保真的PCR合成,那么buffer里面都会配好MgCl2的,通常就是1.5mM,Mg2+浓度越高保真性越差.
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50UL体系
模版：质粒-0.5足够 菌-2ul
dNTP：0.5ul
Taq酶：0.5ul
引物：各0.5ul
10*buffer：5ul
ddH2O：补齐
20ul体系按比例配
当然，这些跟你的材料浓度有关
先这么配看着啦
一般加有mg的buffer的mg都是优化过的，直接使用即可，不用额外加镁离子，用ddH2O补齐体积。如果扩增效果不好就要用不含镁离子的buffer，自己加镁离子来优化体系。
你说的没错
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