噬菌体滴度为什么选蓝斑?原理是什么?
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2025/01/21 00:56:56
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感染非烈性噬菌的大肠杆菌菌体并不裂解,只是生长较正常菌慢,另一方面,环境中带来的野生噬菌体污染也会产生蚀斑,所以单靠数蚀斑来计数有所不足.
你所选用的噬菌体(如M13mp系列)是带有LacZ基因的,当铺在含 IPTG 和 Xgal 的平板上时,噬菌斑将呈蓝色.而外界污染的丝状噬菌体在同样的平板上将呈白色噬菌斑,同时这些噬菌斑还会比文库噬菌体的噬菌斑更大更模糊.所以,用蓝斑来显示噬菌体感染与否要更准确.
注意:只有当噬菌体的感染复度MOI (multiplicity of infection)值远低于1 时(即细胞过量时),噬菌斑的数量才会随着加入噬菌体的量而呈线性增加.
满足上述条件,计数不同浓度梯度下的蓝斑数,就可计算噬菌体滴度.
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