怎样摸索PCR条件我做的 RT-PCR 以内参为对照进行条件摸索 但是就是P出不来条带

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/19 12:11:58
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怎样摸索PCR条件我做的 RT-PCR 以内参为对照进行条件摸索 但是就是P出不来条带
怎样摸索PCR条件
我做的 RT-PCR 以内参为对照进行条件摸索 但是就是P出不来条带

怎样摸索PCR条件我做的 RT-PCR 以内参为对照进行条件摸索 但是就是P出不来条带
一般来说进行pcr摸索条件主要有3个,退火温度、Mgcl2浓度、模板上样量.
如果你要摸索的话,建议先固定某两个值,比如Mgcl2浓度、模板上样量一定,然后退火温度取60、58、56、54等不同温度进行PCR,这样慢慢摸索的话,只要引物正确,一般是能出带的.

退火温度、Mgcl2浓度、模板上样量,也可以调节一下taq酶的量,如果都不行(在阳性对照没问题的情况下),那你要问一下你的引物问题了

PCR首先是用梯度PCR摸退火温度,其次用模板做个对照(可设计内参),其次就是PCR反应体系的配比适当调配下。

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