测磷酸化的蛋白和做免疫共沉淀意义上的区别在哪?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/09 02:18:18
测磷酸化的蛋白和做免疫共沉淀意义上的区别在哪?测磷酸化的蛋白和做免疫共沉淀意义上的区别在哪?测磷酸化的蛋白和做免疫共沉淀意义上的区别在哪?我如果分别去测ILK,AKT的磷酸化水平,就可以知道他们的激活

测磷酸化的蛋白和做免疫共沉淀意义上的区别在哪?
测磷酸化的蛋白和做免疫共沉淀意义上的区别在哪?

测磷酸化的蛋白和做免疫共沉淀意义上的区别在哪?
我如果分别去测ILK,AKT的磷酸化水平,就可以知道他们的激活程度了,还有必要做免疫共沉淀吗?免疫共沉淀的结果是提示ILK/AKT结合在一起的水平有多高,但是结合也就意味着磷酸化,似乎两者做出的结果提示的是同一种东西?如果是这样,那我就没必要去做CO-IP了,后者肯定更烦更贵.
请大家赐教,这两天困扰我很久了这个问题我是这样想的,
测免疫共沉淀,目的是测这两种蛋白是否一个是激酶,另外一个是底物
也就是说这两个蛋白作用后才磷酸化
如果你只测磷酸化水平,有可能是其他蛋白激酶把他磷酸化了.
晕,不知道说的是否清楚,是否有道理多谢!经过几位老师的指点我发现我的问题有点不对,应该是单纯WB测磷酸化的蛋白与做免疫沉淀测磷酸化的蛋白之间的差别.对于你的第二个问题,我觉得差别不大.既然都是测磷酸化程度,那么WB显然比IP更简单,所以我会选择WB.据我观察,早期文献一般都会用WB测总蛋白,然后用IP测磷酸化程度;做IP时所用的抗体往往是针对某个磷酸化位点的抗体,而不是针对整个磷酸化分子的抗体,这大概是因为当时没有合适的抗体产品.现在如果你有针对某个磷酸化分子的抗体,那么做WB显然更简单.
但是无论是做IP还是WB,用的抗体都是磷酸化的抗体,应该说IP和WB用的抗体是一样的.如果只单纯WB去测总蛋白,而非磷酸化的那我想是没有意义的,信号转导关键就在蛋白磷酸化呀.

测磷酸化的蛋白和做免疫共沉淀意义上的区别在哪? 蛋白和RNA的共沉淀要做蛋白A和miRNA的免疫共沉淀,蛋白是上游,可是看到免疫共沉淀都是蛋白与蛋白之间的作用,这个做RNA的怎么做啊? pull-down assay和免疫共沉淀的区别 求做染色质免疫共沉淀的原理和大致步骤 免疫共沉淀 若是测定三个蛋白的模块怎样做?需要三个的抗体吗? 磷酸化蛋白指的是什么?怎么知道自己做的蛋白是磷酸化蛋白?我做的是western blotJAK 和stat是不是磷酸化因子? 染色体免疫共沉淀中用的蛋白A/G琼脂糖可以自己做吗?该如何制作?难道只能买公司的? 已知两个蛋白有相互作用,用其中一个蛋白的抗体做免疫共沉淀,SDS-PAGE胶电泳后出现几条带?出现两条带 为什么免疫共沉淀结果跑出的带比直接跑western的带要粗?是不是因为跑出的带粗 才说明 我现在要做免疫共沉淀检测蛋白质与蛋白质之间的相互作用,我是个新手,从来没做过,我看过一些文献,文献上说的做法大都不太一样,我有点糊涂了.我想问一下,是不是先提蛋白,然后做免疫沉 在免疫共沉淀过程中的问题~加蛋白标签我用加了GFP或者Myc标签的表达质粒表达蛋白,然后做CO-IP!用抗GFP抗体将复合物拉下来可以不?GFP会不会和细胞内其他蛋白相互作用也形成复合物而影响结 蛋白激酶与蛋白磷酸酶的区别蛋白激酶不是也是磷酸化蛋白的吗?与蛋白磷酸酶有什么区别呢? 免疫印记和免疫沉淀的不同?都可以测蛋白积累量,但不清楚到底做什么的,尤其是免疫沉淀. 请问底物水平磷酸化和氧化磷酸化的意义,我要怎么答啊? 免疫共沉淀可以检测基因蛋白表达吗? 做免疫共沉淀是电泳图怎么看?特异性条带怎么区别? 免疫共沉淀与免疫沉淀区别希望说简单点, 计划免疫和特异性免疫的区别 主动免疫和被动免疫的区别.