一、请设计一个实验区分E.coli 和Staphylococcus aureus,简述实验过程和实验原理.
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/28 23:23:14
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革兰氏染色法
大肠杆菌E. coli 为阴性菌
金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus为阳性菌
革兰氏染色原理:
G+菌:细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔障缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上.呈紫色.
Gˉ菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,沙黄复染后呈红色.
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:
1)涂片固定.
2)草酸铵结晶紫染1分钟.
3)自来水冲洗.
4)加碘液覆盖涂面染1分钟.
5)水洗,用吸水纸吸去水分.
6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,30秒后水洗,吸去水分.
7)蕃红染色液(稀)(或沙黄)染10秒钟后,自来水冲洗.干燥,镜检.
染色的结果,革兰氏正反应菌体都呈紫色,负反应菌体都呈红色
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