转基因株系怎样通过设计半定量 RT-PCR的引物区分内源表达与外源表达?
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/21 01:16:13
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转基因株系怎样通过设计半定量 RT-PCR的引物区分内源表达与外源表达?
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转基因株系怎样通过设计半定量 RT-PCR的引物区分内源表达与外源表达?
因为你是设计半定量RT-PCR的引物,所以你并不需要全长的ORF,只要一部分序列就可以了.这样你在设计引物的时候,将内源基因和外源转入基因进行比对,选取二者特异性的区域设计两对引物.一对是内源基因的特异性引物,一对外源基因的特异性引物.这样你分别用不同的引物做RT-PCR就知道是内源或者外源基因表达了.而且你还可以进行表达量的半定量分析.
内源基因和外源基因的说法不科学,应为核DNA和mRNA,后者是表达,前者本来就存在不是表达。