IP,IB全细胞裂解物对照IP,IB图中WCL是怎样做对照的?是没有转基因或诱导前的细胞裂解液?里面的目的蛋白应该比较少?
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/27 12:34:52
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IP,IB全细胞裂解物对照IP,IB图中WCL是怎样做对照的?是没有转基因或诱导前的细胞裂解液?里面的目的蛋白应该比较少?
IP,IB全细胞裂解物对照
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WCL的全称是whole cell lysate,中文就是全细胞裂解液对吧?如果是这样的话,这个部分的目的就是研究细胞里面你想要研究的蛋白表达情况.IP的就是你用抗体pull down以后得到的目的蛋白.
我们做co-IP研究A和B蛋白相互作用的时候,一般会在细胞里面转染质粒,分别表达A和B蛋白.等蛋白表达出来以后,裂解细胞,得到WCL,直接做western blotting,首先确定它们都能表达且表达量一致.剩下的会加A蛋白的抗体,将它IP下来,如果它与B蛋白有相互作用也会将B蛋白拉下来.这时再用B蛋白的抗体看看能否检测到B蛋白,就能研究AB有没有相互作用.你是做什么实验啊,可以简单说一下吗?这样才能帮你分析哈.如果你要诱导细胞的话,应该就是没有有诱导的细胞裂解液,我们一般加30ug左右全蛋白就可以跑出来条带了.
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western blot图中,IP IB Flag 左边那些VEGFR-3-Flag,p85α-HA IB:Flag IB:HA我稍微有点明白了，但还是有几点不明白：（1）“从最右边看，表示细胞再转染了这三种质粒后，能够在细胞中表达”怎么看出来
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