请问下鉴别分解纤维素菌的时候,刚果红要加多少啊?还有采用什么纤维素呢,普通的做薄层的可以么
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/19 15:58:58
请问下鉴别分解纤维素菌的时候,刚果红要加多少啊?还有采用什么纤维素呢,普通的做薄层的可以么
请问下鉴别分解纤维素菌的时候,刚果红要加多少啊?还有采用什么纤维素呢,普通的做薄层的可以么
请问下鉴别分解纤维素菌的时候,刚果红要加多少啊?还有采用什么纤维素呢,普通的做薄层的可以么
鉴别纤维素分解菌用纤维素刚果红琼脂平板,刚果红浓度0.2-0.4g/L,纤维素一般用羧甲基纤维素钠(CMC-Na),可以在配制培养基时加刚果红,培养后显示降解圈.也可以配制培养基时不加,等菌落长出后用1g/L的刚果红覆盖菌落染色30mins,用1mol/L的氯化钠脱色30mins,显示降解圈.
常用的刚果红染色法有两种,一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,另一种是在倒平板时就加入刚果红。 方法一, 在长出茵落的培养基上,覆盖质量浓度为1 mg/mI。的CR溶液,10~15 min后,倒去CR溶液,加入物质的量浓度为l mol/I。的NaCI溶液,15 min后倒掉NaCl溶液,此时,产生纤维素酶的茵落周围将会出现透明圈。(加NaCl的原因:刚果红是结合到培养基的多糖底物,但...
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常用的刚果红染色法有两种,一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,另一种是在倒平板时就加入刚果红。 方法一, 在长出茵落的培养基上,覆盖质量浓度为1 mg/mI。的CR溶液,10~15 min后,倒去CR溶液,加入物质的量浓度为l mol/I。的NaCI溶液,15 min后倒掉NaCl溶液,此时,产生纤维素酶的茵落周围将会出现透明圈。(加NaCl的原因:刚果红是结合到培养基的多糖底物,但分解纤维素的细菌可以产纤维素酶,能分解这个多糖底物成为寡糖,这样刚果红就不能结合上去了,氯化钠就可以使结合不牢的刚果红洗去,这样就留下大小不一的透明圈,大的透明圈分解纤维素的能力就强)2.方法二 配制质量浓度为10 mg/mI。的CR溶液,灭菌后,按照每200 mI。培养基加入1 mI。的比例加入CR溶液,混匀后倒平板。等培养基上长出茵落后,产生纤维素酶的菌落周围将会出现明显的透明圈两种刚果红染色法的比较 : 刚果红在筛选纤维素分解菌上的应用已经有超过20年的历史,课本中给出了两种方法。方法一是传统的方法,缺点是操作繁琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂;其优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。方法二的优点是操作简便,不存在菌落混杂问题,缺点是由于在纤维素粉和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质,可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应。但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊,因为培养基中纤维素占主要地位,因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分。方法二的另一缺点是:有些微生物具有降解色素的能力,它们在长时间培养过程中会降解刚果红而形成明显的透明圈,与纤维素分解菌不易区分
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