设计酒精酵母的分离纯化的方案这是一个实验
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/24 10:28:57
设计酒精酵母的分离纯化的方案这是一个实验
设计酒精酵母的分离纯化的方案
这是一个实验
设计酒精酵母的分离纯化的方案这是一个实验
步骤 ：
5.1 稀释涂布平板法
5.1.1 倒平板
将酵母能生长的培养基分别倒平板.
倒平板的方法：右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边,用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出,试管或瓶口保持对着火焰；然后左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝,迅速倒人培养基约15ml,加盖后轻轻摇动培养皿,使培养基均匀分布在培养皿底部,然后平置于桌面上,待凝后即为平板.
5.1.2 制备混菌稀释液
用一支lml无菌吸管从中吸取1ml混菌悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀,然后用无菌吸管从此试管中吸取lml(无菌操作见图-2)加入另一盛有9ml无菌水的试管中,混合均匀,以此类推制成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6不同稀释度的混菌溶液,注意：操作时管尖不能接触液面,每一个稀释度换一支试管（图4-1 A）.
5.1.3 涂布
将上述每种培养基的三个平板底面分别用记号笔写上10-4、10-5和10-6三种稀度,然后用无菌吸管分别由10-4、10-5和10-6
三管混菌稀释液中各吸取0.1或0.2ml,小心地滴在对应平板培养基表面中央位置(图4-1 B).
用无菌玻璃涂棒按图4-2所示,右手拿无菌涂棒平放在平板培养基表面上,将菌悬液先沿同心圆方向轻轻地向外扩展,使之分布均匀.室温下静置5～l0min,使菌液浸入培养基.
5.1.4 培养
5.1.5 挑菌落
将培养后长出的单个菌落分别挑取少许细胞接种到上述三种培养基斜面上(图4-1 C),分别置28℃和37℃温室培养.若发现有杂菌,需再一次进行分离、纯化,直到获得纯培养.
5.2 平板划线分离法
5.2.1 倒平板
按稀释涂布平板法倒平板,并用记号笔标明培养基名称、样品编号和实验日期.
5.2.2 划线
在近火焰处,左手拿皿底,右手拿接种环,挑取上述10-l的混菌悬液一环在平板上划线(图4-3).划线的方法很多,但无论采用哪种方法,其目的都是通过划线将样品在平板上进行稀释,使之形成单个菌落.
用接种环以无菌操作挑取混菌悬液一环,先在平板培养基的一边作第一次平行划线3～4条,再转动培养皿约70度角,并将接种环上剩余物烧掉,待冷却后通过第一次划线部分作第二次平行划线,再用同样的方法通过第二次划线部分作第三次划线和通过第三次平行划线部分作第四次平行划线(图4-4).划线完毕后,盖上培养皿盖,倒置于温室培养.
5.2.3 挑菌落
同稀释涂布平板法,一直到分离的微生物认为纯化为止.
5.2.5 结果判定
所做涂布平板法和划线法是否较好地得到了单菌落?如果不是,请分析其原因并重做.
在三种不同的平板上你分离得到哪些类群的微生物?简述它们的菌落特征.