过氧化物酶的分离纯化及鉴定如何设计这个实验

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2024/11/25 20:19:16

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过氧化物酶的分离纯化及鉴定如何设计这个实验
过氧化物酶的分离纯化及鉴定
如何设计这个实验

过氧化物酶的分离纯化及鉴定如何设计这个实验
1.首先要知道说要分离的过氧化物酶的基本物理化学性质,比如分子量,等电点等.还要知道该酶是胞外酶还是胞内,如果是胞内酶那么它处在细胞的那个位置,细胞膜上,胞质中还是核内?
2.知道酶处在细胞的位置后,破碎细胞,收集相应位置的细胞破碎物（液）
3.离心,收集上清.
4.粗提.用硫酸铵沉淀.收集沉淀,溶解.
5.初级分离.一般这一步用凝胶过滤.
6.精细分离.这一步用层析（离子交换层析）
7.如果得到样品不是很纯,还有杂带,5,6还可以多次使用.
8电泳.一般只能有一条带,通过标准蛋白（marker）分析该条带的分子量.看看是不是所要的蛋白质.

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