某研究小组发现某材料中含有一种抗肿瘤的有效成分1.请设计鉴定和分离纯化该物质的方案2.如果该物质是蛋白质,如何获得其基因3.若要大量生产该物质,请设计初步方案
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2025/02/04 05:49:40
某研究小组发现某材料中含有一种抗肿瘤的有效成分1.请设计鉴定和分离纯化该物质的方案2.如果该物质是蛋白质,如何获得其基因3.若要大量生产该物质,请设计初步方案
某研究小组发现某材料中含有一种抗肿瘤的有效成分
1.请设计鉴定和分离纯化该物质的方案
2.如果该物质是蛋白质,如何获得其基因
3.若要大量生产该物质,请设计初步方案
某研究小组发现某材料中含有一种抗肿瘤的有效成分1.请设计鉴定和分离纯化该物质的方案2.如果该物质是蛋白质,如何获得其基因3.若要大量生产该物质,请设计初步方案
提取、纯化和鉴定有效成分,并对纯化水提液(RMW)和醇提液(RME),对RME以3%HCl溶解、有机溶剂萃取和水相浓缩得到纯化提取物1、2、3(PE1、PE2、PE3).用MTT法测定各提取物的抑瘤活性.根据抑瘤实验结果,通过凝胶和硅胶柱层析将PE2进一步分离得到两个单体化合物PF1和PF2.提取RME后的的成分作进一步的活性研究材料渣用水回流提取,去除蛋白和鞣酸,再经乙醇沉淀和冷冻干燥得到多糖成分(RMP).有效成分采用薄层层析和改良碘化铋钾显色对其进行鉴定分析.用电喷雾质谱ESI-MS检测单体化合物PF1和PF2的分子量.用紫外分光光度计检测RMP的纯度.结果:RMW和RME对K562、BGC823及TE13三种肿瘤细胞的增殖反应均有明显的抑制作用(P〈0.01),并有良好的量效及时效关系,RMP无此作用.进一步将RME应用3步法纯化得到PE1、PE2、PE3.PE1和PE2对上述3种细胞的增殖反应均有明显的抑制作用(提高了近10倍)(P〈0.01),PE3无此抑制作用.有效成分分析结果显示,PE2主要含一系列生物碱成分.对PE2进一步分离得到两个化合物PF1和PF2,分子量分别为624和610.PF1和PF2对K562、BGC823及TE13细胞均有显著抑制作用(P〈0.01),PF2的抑制作用更强,PF2可导致上述细胞的形态学改变,表现为细胞体积变小,形态不规则等.PF2对肿瘤组织原代培养细胞增殖反应有较强抑制作用(P〈0.01)醇提物的作用高于水提物.PE2是醇提物抗肿瘤的有效部位,其化学成分为生物碱;PF1和PF2均是醇提物抗肿瘤的有效成分,可能为蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱,PF2对肿瘤组织原代培养细胞也有较强的杀伤作用