Sephadex G-10凝胶色谱法分离原理能不能发个短小精悍的，我可是要手动抄写的。
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/23 14:35:54
Sephadex G-10凝胶色谱法分离原理能不能发个短小精悍的，我可是要手动抄写的。
Sephadex G-10凝胶色谱法分离原理
能不能发个短小精悍的，我可是要手动抄写的。
Sephadex G-10凝胶色谱法分离原理能不能发个短小精悍的，我可是要手动抄写的。
凝胶色谱法分离原理：
一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动：垂直向下的移动和无定向的扩散运动.大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布颗粒之间,所以在洗脱时向下移动的速度较快.小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入凝胶相内,在向下移动的过程中,从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒,如此不断地进入和扩散,小分子物质的下移速度落后于大分子物质,从而使样品中分子大的先流出色谱柱,中等分子的后流出,分子最小的最后流出,这种现象叫分子筛效应.具有多孔的凝胶就是分子筛.
各种分子筛的孔隙大小分布有一定范围,有最大极限和最小极限.分子直径比凝胶最大孔隙直径大的,就会全部被排阻在凝胶颗粒之外,这种情况叫全排阻.两种全排阻的分子即使大小不同,也不能有分离效果.直径比凝胶最小孔直径小的分子能进入凝胶的全部孔隙.如果两种分子都能全部进入凝胶孔隙,即使它们的大小有差别,也不会有好的分离效果.因此,一定的分子筛有它一定的使用范围.
在凝胶色谱中会有三种情况,一是分子很小,能进入分子筛全部的内孔隙；二是分子很大,完全不能进入凝胶的任何内孔隙；三是分子大小适中,能进入凝胶的内孔隙中孔径大小相应的部分.大、中、小三类分子彼此间较易分开,但每种凝胶分离范围之外的分子,在不改变凝胶种类的情况下是很难分离的.对于分子大小不同,但同属于凝胶分离范围内各种分子,在凝胶床中的分布情况是不同的：分子较大的只能进入孔径较大的那一部分凝胶孔隙内,而分子较小的可进入较多的凝胶颗粒内,这样分子较大的在凝胶床内移动距离较短,分子较小的移动距离较长.于是分子较大的先通过凝胶床而分子较小的后通过凝胶床,这样就利用分子筛可将分子量不同的物质分离.另外,凝胶本身具有三维网状结构,大的分子在通过这种网状结构上的孔隙时阻力较大,小分子通过时阻力较小.分子量大小不同的多种成份在通过凝胶床时,按照分子量大小排队,凝胶表现分子筛效应.
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交联葡聚糖凝胶（Sephadex）：
⑴ Sephadex G 交联葡聚糖的商品名为Sephndex,不同规格型号的葡聚糖用英文字母G表示,G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍.例如,G-25为每克凝胶膨胀时吸水2.5克,同样G-200克每克千胶吸水20克.交联葡聚糖凝胶的种类有G-10,G-15,G-25,G-50,G-75,G-100,G-150,和G-200.因此,“G”反映凝胶的交联程度,膨胀程度及分部范围.
⑵ Sephadex LH-20,是Sephadex G-25的羧丙基衍生物,能溶于水及亲脂溶剂,用于分离不溶于水的物质.
交联葡聚糖凝胶是 将纯化后的线性葡聚糖（a-1,b-吡喃型葡聚糖）与环氧氯丙烷反应,再导入丙三醇侧链而在葡聚糖链间形成交联链,再将所得的凝胶制成直径不同的球形即可.所得三维实体在水中能溶胀而不能溶解.交联度越高,凝胶孔径越小.
各种葡聚糖凝胶的分离范围与用途：
SephadexG-10葡聚糖凝胶 G-10 分离范围