试写出革兰氏染色的步骤如题
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/28 16:22:14
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试写出革兰氏染色的步骤如题
试写出革兰氏染色的步骤
如题
试写出革兰氏染色的步骤如题
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立.未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察.染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定.革兰氏染色属复染法,即将标本固定后,先用结晶紫染色1分钟后水洗,然后加革兰碘液媒染一分钟后用酒精脱色,再用稀释石炭酸复红复染.染色后除可以看到细菌形态外,还可将细菌分为两大类,即不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌(G+).被酒精脱色复染成红色者为革兰氏阴性菌(Gˉ).革兰氏染色原理尚不肯定,可能与细菌所带核糖核酸、细菌壁结构通透性、等电点等因素有关.致病菌如金黄色葡萄球菌、绿色溶血性链球菌、肺炎球菌、白喉杆菌、炭疽杆菌等属革兰氏染色阳性菌.百日咳杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、流行性脑膜炎双球菌、淋病双球菌等均属革兰氏阴性.所以根据细菌的革兰氏染色性质,可以缩小鉴定范围,有利于进一步分离鉴定,以对疾病做出诊断.又由于各种抗生素的抗菌谱不同,革兰氏染色尚可做为选用抗生素的参考.
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:
1)涂片固定.
2)草酸铵结晶紫染1分钟.
3)自来水冲洗.
4)加碘液覆盖涂面染1分钟.
5)水洗,用吸水纸吸去水分.
6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,30秒后水洗,吸去水分.
7)蕃红梁色液(稀)染10秒钟后,自来水冲洗.干燥,镜检.
染色的结果,革兰氏正反应菌体都呈紫色,负反应菌体都呈红色.
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