抽提DNA去除蛋白质时,怎样使用酚与氯仿较好?

来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/22 20:28:31
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抽提DNA去除蛋白质时,怎样使用酚与氯仿较好?
抽提DNA去除蛋白质时,怎样使用酚与氯仿较好?

抽提DNA去除蛋白质时,怎样使用酚与氯仿较好?
>>> 酚与氯仿是非极性分子,水是极性分子,当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时,蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去使蛋白失去水合状态而变性.经过离心,变性 蛋白质的密度比水的密度为大,因而与水相分离,沉淀在水相下面,从而与溶解在水相中的DNA分开.而酚与氯仿有机溶剂比重更大,保留在最下层.
作 为表面变性的酚与氯仿,在去除蛋白质的作用中,各有利弊,酚的变性作用大,但酚与水想有一定程度的互溶,大约10%~15%的水溶解在酚相中,因而损失了 这部分水相中的DNA,而氯仿的变性作用不如酚效果好,但氯仿与水不相混溶,不会带走DNA.所以在抽提过程中,混合使用酚与氯仿效果最好.经酚第一次抽 提后的水相中有残留的酚,由于酚与氯仿是互溶的,可用氯仿第二次变性蛋白质,此时一起将酚带走.也可以在第二次抽提时,将酚与氯仿混合(1:1)使用.

抽提DNA去除蛋白质时,怎样使用酚与氯仿较好? DNA的分离和纯化的问题!首先向问一下：在纯化过程中氯仿-异戊醇是如何去除蛋白质的，然后是在DNA沉淀的时候为什么要加冷的乙醇，接下来是关于SDS市怎样让dna与蛋白质分离的，还有就是RN 怎样去除氯仿中微量的乙醇 ,配饱和酚、氯仿、异丙醇混合溶液配饱和酚、氯仿、异丙醇混合溶液,提取DNA时为沉淀蛋白质,配酚、氯仿、异丙醇混合（25：24：1）溶液,其中酚为水饱和的苯酚,把苯酚加入蒸馏水,至不溶解 怎样去除DNA中的RNA 氯仿如何去除 生化实验,氯仿-异戊醇,氯仿-甲醇在分离DNA和蛋白质的作用上有什么差异吗? 提取DNA时,用的酚氯仿异戊醇 怎么配? DNA序列怎样编码蛋白质 酚氯仿抽提DNA体系后出现的现象及成因,沉淀DNA时为什么要用无水乙醇 想问问酚氯仿法提DNA,在做PCR时,酚,氯仿,异戊醇分别会对PCR产生什么样的影响 用酚/氯仿法提取动物基因组DNA中,酚、氯仿、异戊醇的作用分别是什么 DNA中混有RNA和蛋白质,请问怎么去除 dna与蛋白质组成什么 隐形眼镜上面的蛋白质怎样去除? SDS碱裂解法提取质粒DNA中加酚氯仿的作用是什么?SDS碱裂解法加完溶液3后为什么还要加酚氯仿?它的作用主要是怎样的?及它是怎样配置的? 提取DNA时RNA酶的使用在纯化DNA时需要降解RNA,这时需要加入RNA酶的最终浓度一般是多大啊?比如我DNA溶液时300ul,我需要加入多少10mg/ml的RNA酶溶液,加过后怎么去除这些RNA酶蛋白质? 请问Trizol试剂提取RNA相关问题,请问下为什么在Trizol试剂提取RNA时,加入氯仿离心后RNA在上层水相,DNA在中间层,蛋白质在下层有机相,但用CTAB提取DNA时,加入氯仿后DNA却在上层水相而非中间层呢?