实时荧光定量pcr两步法与三步法的异同是什么?如何选择使用?比如引物退火是54度,选择三步法还是2步法?

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2024/12/26 12:08:48

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异同?我觉得还是看你用的机器和试剂盒吧,主要是那个聚合酶的要求.有的推荐两步法,有的推荐三步法.
比如,ABI,roche都推荐两步法,tiangen的推荐三步法.
我觉得,如果引物设计时的Tm值如果接近60度（比如用ABI的primer express设计的引物）,就直接用两步法；如果Tm值不太符合两步法要求,即60度,还是三步法好些!

嗯，看机器和试剂和的要求，不同的试剂不一样。详细看说明书。机器对试剂的种类也有要求。要看看试剂盒适用于哪些品牌型号的仪器，不合适的话一样也做不好。

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