RT-PCR一步法与两步法有什么不同?

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2024/11/06 02:21:48

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RT-PCR一步法与两步法有什么不同?
博凌科为-为你两步法RT-PCR比较常见,在使用一个样品检测多个mRNA时比较有用.然而一步法RT-PCR具有其他优点.一步法RT-PCR在处理大量样品时易于操作,有助于减少残余污染,因为在cDNA合成和扩增之间不需要打开管盖.一步法可以得到更高的灵敏度,最低可以达到0.1pg总RNA,这是因为整个cDNA样品都被扩增.对于成功的一步法RT-PCR,一般使用反义的基因特异性引物起始cDNA合成.一步法两步法起始第一链cDNA合成使用：起始第一链合成使用 Oligo(dT) GSP引物随机六聚体 GSP引物优点优点灵活方便引物选择扩增酶同逆转录酶预先混合扩增酶的选择转管步骤少,减少污染可能性困难RT-PCR的优化能力高灵敏度同 Platinum酶结合提高特异性适用于大量样品分析同PlatinumPfxTaqDNA聚合酶结合提高忠实性适用于定量PCR 适用于在单个样品中检测几个mRNA

简单点回答吧，RT-PCR包括2步，1、mRNA逆转录为cDNA；2、cDNA做模版的PCR。
合而为一就是一步法，分开就是两步法。
逆转录为cDNA后更容易保存，使用效果更稳定；
一步法更快捷，但重复性不好，搞科研不推荐

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