色谱分离柱如何使用?如何维护?
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/22 20:19:04
色谱分离柱如何使用?如何维护?
色谱分离柱如何使用?如何维护?
色谱分离柱如何使用?如何维护?
样维护好色谱分离柱
加保护柱（预柱）是保护分离柱的有效办法.保护柱是根内装填料与分离柱性质相近的短柱,接在分离柱之前,或代替流路过滤器.保护柱的作用是收集和阻塞分离柱口的化学垃圾,这些垃圾如果直接进入分离柱会逐渐堆积在柱头,最终降低柱效能.保护柱是消耗品,如分析血浆样品,一般分析50个样品后需更换新柱芯.
避免高压冲击分离柱.一般色谱柱都能承受得起高压,但经不住突然变化的高压冲击,这将改变柱床体积,影响柱效.引起高压冲击的原因主要有：进样器的样品阀的缓慢转动、泵启动太快、柱切换等操作.用手动进样阀时的压力变化不大,自动进样阀由于切换较慢,可能会造成压力冲击.
合理选择分离柱.我们知道,选择色谱分离柱主要根据两点,一是根据待测组分的分子量的大小；二是根据流动相条件,包括PH值、离子强度和溶剂极性等.传统硅胶基质的键合相柱要求流动相PH值在3-7之间,极端PH值（>8）的流动相能溶解硅胶,使键合相流失.而目前利用先进的杂化颗粒技术研制的高纯硅胶颗粒填料（如Waters公司的XTerra色谱柱）,集硅胶和多孔聚合物填料的优点为一体,使有机硅烷单元取代了相当一部分占据颗粒内部和表面位置的硅羟基,使这种新型填料具有分辨率高、稳定性强、PH范围宽（1-12）的优势,其性能突破了传统高效液相色谱柱的极限.所以一定要根据分析的对象、流动相的条件选择合适的分离柱,茫然时可向公司的技术人员咨询.
定期冲洗分离柱.每次分析工作结束时,冲洗完缓冲盐后,最后要过度到用强溶剂冲洗柱子,如可用色谱纯甲醇、乙腈冲洗反相C18柱,目的是冲去吸附在柱上的强保留组分.如果用甲醇/水为流动相也应这样冲洗柱子,在一定程度上可恢复柱效.
这个问题太空泛了，根据要分离的组分选择不同组成的色谱柱，这个一般卖柱子的色谱公司会给你选的，至于维护，在使用过程中如果峰分不开了，可以老化一下柱子。