米氏方程是说明?之间的关系,Km的定义?
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/17 06:56:47
米氏方程是说明?之间的关系,Km的定义?
米氏方程是说明?之间的关系,Km的定义?
米氏方程是说明?之间的关系,Km的定义?
表示一个酶促反应的起始速度（v）与底物浓度（[S]）关系的速度方程,v＝Vmax[S]/（Km+[S]）.
酶促反应动力学简称酶动力学,主要研究酶促反应的速度以及其它因素,例如抑制剂等对反应速度的影响.
在酶促反应中,在低浓度底物情况下,反应相对于底物是一级反应（first order reaction）；而当底物浓度处于中间范围时,反应（相对于底物）是混合级反应（mixed order reaction）.当底物浓度增加时,反应由一级反应向零级反应（zero order reaction）过渡.当底物浓度[S]逐渐增大时,速度n相对于[S]的曲线为一双曲线.(如右图)
对于简单的酶促反应
E＋S＝＝ES → E＋P 双曲线方程可以写成：
Vmax[S]
V＝——————（3.1）
Km＋[S]
这个方程称为Michaelis-Menten方程,是在假定存在一个稳态反应条件下推导出来的,其中 Km 值称为米氏常数,Vmax是酶被底物饱和时的反应速度,Km为反应达到1/2Vmax的底物浓度[S],单位一般为mol/L,只由酶的性质决定,而与酶的浓度无关.可用Km的值鉴别不同的酶.当底物浓度非常大时,反应速度接近于一个恒定值.在曲线的这个区域,酶几乎被底物饱和,反应相对于底物S是个零级反应.就是说再增加底物对反应速度没有什么影响.反应速度逐渐趋近的恒定值称为最大反应速度Vmax.对于给定酶量的Vmax可以定义为处于饱和底物浓度的起始反应速度n.对于反应曲线的这个假一级反应区的速度方程可写成一种等价形式：
n（饱和时）＝Vmax＝k[E][S]0＝k[E]total＝k cat[ES] （3.2）
速度常数k等于催化常数k cat,k cat是ES转化为游离的E和产物的速度常数.饱和时,所有的E都是以ES存在.方程（3.2）中还有另一个简单的关系式：Vmax＝k cat [E]total.从中得出：k cat＝Vmax / [E]total.k cat的单位是s－1.催化常数可以衡量一个酶促反应的快慢.
米氏常数Km是酶促反应速度n为最大酶促反应速度值一半时的底物浓度.这可通过用[S]取代米氏方程（3.1）中的Km证明,通过计算可得n＝Vmax /2.
双倒数作图
酶促反应中的Km和Vmax值有几种测量方法.固定反应中的酶浓度,然后分析几种不同底物浓度下的起始速度,就可获得Km和Vmax值.但直接从起始速度对底物浓度的图中确定Km或Vmax值是很困难的,因为曲线接近Vmax时是个渐进过程.所以通常都是利用米氏方程的转换形式求出Km和Vmax值.常用的米氏方程转换形式是Lineweaver-Burk方程,也称为双倒数方程.
1 Km 1 1
——＝ ———·——＋———（3.9）
n Vmax [S] Vmax
使1/ v 对1/[S]作图,可以获得一条直线（如左图）.从直线与x轴的截距可以得到1/Km的绝对值；而1/Vmax是直线与y轴的截距.双倒数作图直观、容易理解,为酶抑制研究提供了易于识别的图形.