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来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/21 01:18:57
英语翻译英语翻译英语翻译材料与方法与玉米atp9进行黏粒杂交的探针是回收自IS1112C系列(带有雄性不育胞质线的雄性可育植物)和Tx398(雄性不育胞质线)的线线粒体DNA文库.黏粒的杂交片段被亚克

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材料与方法
与玉米atp9进行黏粒杂交的探针是回收自IS1112C系列(带有雄性不育胞质线的雄性可育植物)和Tx398(雄性不育胞质线)的线线粒体DNA文库.黏粒的杂交片段被亚克隆至pUC载体进行扩增和测序.基因组DNA和cDNA克隆的双链测序是采用 Sequenase2.0制造商(美国俄亥俄州,克利夫兰市的生物化学公司)所阐述的双脱氧末端终止法.侧翼基因阅读框的寡核苷酸是人工合成于佛罗里达大学的生物研究跨学科中心的DNA合成核心.线粒体RNA是采用Kenell和Pring(1989年)的方法精制而成,而反转录及PCR扩增是根据Saiki与伙伴(1988年)和Kawasaki和Wang的方式进行.
结果
Tx398 atp9和IS1112C atp9 的基因组编码的开放可译框架出现在1.35kb PstI片段上.如果转化是开始于第一个ATG密码子,然后继续至基因组编码的终止密码子,最大的可译框架是与273-bp区域预测分子量为9.49kDa的91-残基多肽是相似的(图1、2).可译框架里的第二个ATG,就是目前已检验过的所有其他植物atp9序列的保存起始密码子(图3).与其他高等植物对比,高粱的atp9序列所保存是222bp显示与4种单子叶有85-99.5%的相似,而与9种双子叶植物则有80.5-89.6%的相似(参考图3).转录编辑改变了明显与高等植物有异的部分atp9.酵母(53.3%相似,Lambertus与伙伴 1979年);与高粱atp9 关系比较疏远的是两个牛核编码(55%和56%,Gay和Walker1985年)以及大肠杆菌(37%,Gay和Walker 1981年).

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