中国药典中药物微生物检测在哪部

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中国药典中药物微生物检测在哪部
你好,微生物检测方法在中国药典2010年版二部附录XI J,具体方法为附录XI J微生物限度检查法
微生物限度检査法系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅
料受微生物污染程度的方法.检查项目包括细菌数、霉菌数、
酵母菌数及控制菌检查.
微生物限度检查应在环境洁净度10 000级下的局部洁
净度100级的单向流空气区域内进行.检验全过程必须严格
遵守无菌操作,防止再污染,防止污染的措施不得影响供试品
中微生物的检出.单向流空气区域、工作台面及环境应定期
按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方
法》的现行国家标准进行洁净度验证.
供试品检查时,如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活
剂,应证明其有效性及对微生物无毒性.
除另有规定外,本检査法中细菌及控制菌培养温度为
30〜35°C;霉菌、酵母菌培养温度为23〜28°C
检验结果以lg,lml、10g、10ml或10cm
2为单位报告,特
殊品种可以最小包装单位报告.
检验量
检验量即一次试验所用的供试品量(g、ml或cm
2
).
除另有规定外,一般供试品的检验量为10g或10ml;膜剂
为100cm
2
»贵重药品、微量包装药品的检验量可以酌减.要
求检查沙门菌的供试品,其检验量应增加20g或20ml(其中
10g或10ml用于阳性对照试验）.
检验时,应从2个以上最小包装单位中抽取供试品,膜剂
还不得少于4片.
一般应随机抽取不少于检验用量（两个以上最小包装单
位）的3倍量供试品.
供试液的制备
根据供试品的理化特性与生物学特性,采取适宜的方法
制备供试液.供试液制备若需加温时,应均匀加热,且温度不
应超过451C.供试液从制备至加人检验用培养基,不得超过
1小时.
除另有规定外,常用的供试液制备方法如下.
1. 液体供试品
取供试品10ml ,加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至
100ml,混匀,作为1 ： 10的供试液.油剂可加人适量的无菌
聚山梨酯80使供试品分散均匀.水溶性液体制剂也可用混
合的供试品原液作为供试液.
2. 固体、半固体或黏稠性供试品
取供试品10g ,加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至
100ml,用匀浆仪或其他适宜的方法,混匀,作为1 ： 10的供试
液.必要时加适量的无菌聚山梨酯80,并置水浴中适当加温
使供试品分散均匀.
3. 需用特殊方法制备供试液的供试品
(1) 非水溶性供试品
方法1取供试品5g(或5ml),加至含溶化的（温度不超
过45'C)5g司盘80、3g单硬脂酸甘油酯、10g聚山梨酯80无
菌混合物的烧杯中,用无菌玻棒搅拌成团后,慢慢加人45"的
pH7. 0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml,边加边搅拌,使供
试品充分乳化,作为1 ： 20的供试液.
方法2 取供试品10g,加至含20ml无菌十四烷酸异丙
酯（制法见附录H H无菌检査法中供试品的无菌检查项下）
和无菌玻璃珠的适宜容器中,必要时可增加十四烷酸异丙酯
的用量,充分振摇,使供试品溶解.然后加人45\：的pH7.0
无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml,振摇5〜：L0分钟,萃取,静
置使油水明显分层,取其水层作为1 •• 10的供试液.
(2) 膜剂供试品.
取供试品100cm
2
,剪碎,加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓
冲液lOOmK必要时可增加稀释液）,浸泡,振摇,作为1 ： 10的
供试液(3) 肠溶及结肠溶制剂供试品
取供试品10g,加pH6. 8无菌磷酸盐缓冲液（用于肠溶制
剂）或pH7. 6无菌磷酸盐缓冲液（用于结肠溶制剂）至100ml,
置45t:水浴中,振摇,使溶解,作为1 :
10的供试液.
(4) 气雾剂、喷II剂供试品
取规定量供试品,置冰冻室冷冻约1小时,取出,迅速消
毒供试品开启部位,用无菌钢锥在该部位钻一小孔,放至室
温,并轻轻转动容器,使抛射剂缓缓全部释出.用无菌注射器
吸出全部药液,加至适量的PH7. 0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液
(若含非水溶性成分,加适量的无菌聚山梨酯80)中,混匀,取
相当于10g或10ml的供试品,再稀释成1 ： 10的供试液.
(5) 贴剂供试品
取规定量供试品,去掉贴剂的保护层,放置在无菌玻璃或
塑料片上,粘贴面朝上.用适宜的无菌多孔材料（如无菌纱
布）覆盖贴剂的粘贴面以避免贴剂粘贴在一起.然后将其置
于适宜体积并含有表面活性剂（如聚山梨酯80或卵磷脂）的
稀释剂中,用力振荡至少30分钟,制成供试液.贴剂也可采
用其他适宜的方法制备成供试液.
(6) 具抑菌活性的供试品
当供试品有抑菌活性时,采用下列方法进行处理,以消除
供试液的抑菌活性,再依法检查.常用的方法如下.
① 培养基稀释法取规定量的供试液,至较大量的培养
基中,使单位体积内的供试品含量减少,至不含抑菌作用.测
定细菌、霉菌及酵母菌的菌数时,取同稀释级的供试液2ml,每
lml供试液可等量分注多个平皿,倾注琼脂培养基,混匀,凝固,
培养,计数.每lml供试液所注的平皿中生长的菌落数之和即
为lml的菌落数,计算每lml供试液的平均菌落数,按平皿法
计数规则报告菌数;控制菌检查时,可加大增菌培养基的用量.
② 离心沉淀法取一定量的供试液,500转/分钟离心3
分钟,取全部上清液混合.用于细菌检査.
③ 薄膜过滤法见细菌、霉菌及酵母菌计数项下的"薄
膜过滤法".
④ 中和法凡含汞、砷或防腐剂等具有抑菌作用的供试
品,可用适宜的中和剂或灭活剂消除其抑菌成分.中和剂或
灭活剂可加在所用的稀释液或培养基中.