在做RT-PCR时,或者是一般的PCR时,退火温度怎么设置,退火温度和Tm值之间有怎么样的关系?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/22 00:53:01
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在做RT-PCR时,或者是一般的PCR时,退火温度怎么设置,退火温度和Tm值之间有怎么样的关系?
不同的PCR MIX所设置的退火温度是不一样的,有的比最低Tm值低5℃,有的低3℃,请你参考你所买的PCR MIX的说明书,上面肯定有详细说明.
一般PCR比最低Tm值低1-5℃,都没什么问题.
RT-PCR的文献上,有推荐的设计软件,也有推荐的PCR MIX,跟着说明书做就没有问题了.

退火温度和Tm值有关,一般的说是在Tm值下5度,我用的话一般在Tm值下2-3度

一般情况下退火温度要比Tm值低5℃

在做RT-PCR时,或者是一般的PCR时,退火温度怎么设置,退火温度和Tm值之间有怎么样的关系? 普通的RT-PCR 和荧光定量PCR,在反转录这一步是不是一样的?我买的是普通的反转录试剂盒,是不是再增加一个做荧光定量PCR的PCR那一部分就可以了? 做RT-PCR的目的是什么? 做pcr时最后保存4度的时间应该以多少为宜?程序设定是10分钟,我在做PCR时由于赶时间,十分钟还没有到就结束了PCR过程,请问会影响到结果吗? RT-PCR 的原理 PCR与RT-PCR的比较 realtime PCR 做实时荧光PCR,就用染料的那种,是不是有要求PCR的片段,一般在100BP左右?realtime PCR1.做实时荧光PCR,就用染料的那种,是不是有要求PCR的片段,一般在100BP左右?2.坐标线是否是用克隆的方 在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带,请问这是为什么? PCR的96孔板与qPCR(荧光定量PCR,real time PCR)的96孔板是一样的吗?RT...或者用普通PCR 96孔板能不能做qPCR实验? 请问做RT-PCR时,怎么根据扩增的片段长度确定dNTP的用量? 什么是半定量RT-PCR,扩增时为什么在指数增长期终止,怎么确定的最好能阐述一下半定量RT-PCR的一些基本知识.急用 跑pcr时,加药顺序有要求吗?还有做pcr是要注意什么 RT-PCR时,扩增片段长度多态性 PCR加A的问题做PCR时,3`末端加几个A? 怎样针对VEGF做RT-PCR实时PCR.,之前没做过,想知道流程的。 DNA RNA做PCR问题请问DNA做PCR的要求怎么样,比如DNA多长能做多长不能做,越长越好还是越短越好’反之RNA做RT-PCR也一样吗?另外DNA直接做PCR,而RNA则分反转录PCR和荧光定量PCR对吗?荧光定量是只用来 请问做PCR时是否有一些措施或机制可以防止或者减少扩增过程中的DNA突变率?PCR扩增出来的片段和在生物体内自己复制的DNA片段,哪个突变率更大? 医学检验中的PCR技术是做什么用的?PCR技术可以应用在什么方面?做哪些检查?