一些通用引物的退火温度?比如m13

一些通用引物的退火温度?比如m13 M13通用引物的设计是针对M13噬菌体的那一段基因?即质粒中有M13的那一段可以用M13通用引物进行测序? 引物退火温度是53度,如何设置两个梯度的退火温度 pgm-t载体克隆片段pgm-t载体,可以用M13通用引物测序吗pgm-t载体克隆出来的片段,可以用M13通用引物测序吗?pGM-T载体说明书上没有说这个M13引物可以用!谁知道M13这个位点,到克隆片段距离多少bP啊? 退火温度低会对PCR产生什么影响?我做菌落PCR,使用一个特异性上游引物和一个T7下游通用引物,退火温度用的是较低的48度,但引物的Tm分别为57,71,阳性对照都没有出结果,请问是怎么回事呢?退火 如何进行引物退火温度的梯度设置 关于细菌基因组PCR的问题向做过细菌PCR的请教：体系一般都是多少,退火温度呢我们做过退火温度有48度、43度、56度,引物是通用引物1492R和27F,模板和引物都没问题,是不是引物和模板不匹配,10 关于引物的退火温度?为什么用公式计算的引物退火温度和试剂公司送来的合成报告单上的退火温度不一致? 退火的温度选择决定于引物的碱基序列?A 引物序列越长 退火温度越低B 引物序列越短 退火温度越低C 引物中C G 含量越高 退火温度越高D 引物中A T 含量越低 退火温度越低选择是A退火就是复性 为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? 引物ITSR/F退火温度是多少?急 ISSR-PCR引物的退火温度问题我做ISSR-PCR引物的退火温度能不能直接使用primer5.0这个软件计算得出的退火温度.理论上来说这是最佳的退火温度吗? 关于退火温度与引物Tm~我用PP5做的引物发现引物Tm值比退火温度低 这很奇怪啊,做PCR是不是退火温度一定要比Tm高呢? 我设计了引物,结果生物公司合成的引物退火温度比我设计的低10度,为什么,我用哪个退火温度 我PCR产物大小141bp,纯化后,连接到pGEM-T载体克隆,使用M13通用引物,扩增片段长度是多少?我想知道假如用pGEM-T通用引物M13F 5'TGTAAAACGACGGCCAGT3'和M13 RV 5'CAGGAAACAGCTATGACC3'引物进行菌液PCR,扩增出的片段 ssr引物筛选我是做分子标记的,现在遇到一些问题?1、根据引物报告单上的退火温度,上游和下游温度不一样怎么选择?2、我有600对引物,3个亲本,现在要筛一遍,用96孔的PCR板P的时候,每一对退火 为什么设计出来的引物退火温度过高?我使用的是oligo软件 PCR过程中引物的碱基数量与种类 和 退火温度有什么关系?理由