PCR片段直接测序和PCR片段经克隆后测序的结果有何区别?

PCR片段直接测序和PCR片段经克隆后测序的结果有何区别? 如果PCR产物可以直接用来测序,但为什么还需要买PCR产物纯化试剂盒,还要进行连接转化提质粒酶切?我的实验是在PCR产物电泳后发现有自己所需要的长度的目的片段.如果直接测序和经过连接转 pGEM-T载体的通用引物序列有哪些,pcr得到的片段长度是多少使用pGEM－T载体克隆了一段500bp的片段,想通过pcr后再酶切分型,筛选用于测序的样品.但在做pcr的时候不知道采用什么样的引物可以得 能不能用PCR直接扩增目的片段,然后转入表达载体,代替在克隆载体或dh5a中的扩增 PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体+目的片段,那么转化挑克隆提取的质粒片段是多大?PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体的序列是大约3000bp,PCR产物的目的片段是450bp,那么：经过连接、转化后挑单克隆,提取质粒,提 绝对定量PCR/荧光定量pcr 用途/半定量pcr/pcr荧光测定/pcr片段纯化 细菌提DNA后PCR和提RNA后逆转录PCR的区别已知细菌无内含子,假设我需要PCR一个细菌的一个基因片段,直接提细菌DNA然后PCR和提细菌总RNA后逆转录成cDNA在PRC有什么区别?引物可以通用吗? 目的片段转入表达载体后,用什么方法检测?有没有除了测序,酶切,PCR,探针检测以外的方法?最好详细点. 什么是基因?PCR技术没有发明之前,研究者如何克隆一个基因片段呢? PCR产物直接测序的原理 我PCR产物大小141bp,纯化后,连接到pGEM-T载体克隆,使用M13通用引物,扩增片段长度是多少?我想知道假如用pGEM-T通用引物M13F 5'TGTAAAACGACGGCCAGT3'和M13 RV 5'CAGGAAACAGCTATGACC3'引物进行菌液PCR,扩增出的片段 DNA分子克隆与PCR扩增DNA的区别T载体是克隆载体,能把目的基因片段转染到大肠杆菌扩增,但不表达.我新手弱弱的问一句为什么不直接把目的片段拿去跑PCR就行了,干嘛要用克隆载体去获得大量 约1800长度的片段,pcr扩增后显示长度合适,进行t-blunt载体克隆,转化感受态细胞,长出菌很少,甚至没有 RT-PCR时,扩增片段长度多态性 PCR杂带太亮怎么回收目的片段 转化后挑取含有目的片段的单菌落摇菌扩增以后划盘子,几天后挑取部分菌落做PCR无带,不知是何原因?划盘子后剩余的菌液提质粒测序结果与预期的片段相同，通用引物和自身引物开始都能得 PCR 产生比目的片段小的片段,这是怎么回事,怎么样处理?PCR扩增时,电泳后发现的得到的片段远远小于目的片段.目的片段曾今扩增出来过?这是什么原因,怎么样处理 . 为什么送去测序的片段要通过菌液,而不是直接拿PCR去测序?