转化后挑取含有目的片段的单菌落摇菌扩增以后划盘子,几天后挑取部分菌落做PCR无带,不知是何原因?划盘子后剩余的菌液提质粒测序结果与预期的片段相同，通用引物和自身引物开始都能得

转化后挑取含有目的片段的单菌落摇菌扩增以后划盘子,几天后挑取部分菌落做PCR无带,不知是何原因?划盘子后剩余的菌液提质粒测序结果与预期的片段相同，通用引物和自身引物开始都能得 菌落pcr是否可以直接扩增基因组上的目的基因?单菌落需要特殊处理吗 重组质粒双酶切带与PCR扩增带大小不一PCR扩增出1kb的带，双酶切(3h)切出的是2kb的带，和载体相比，切出的带不亮，有的根本看不清，可能是目的片段不浓，如果是质粒不纯，我是从单菌落来 单菌落菌液PCR检测请问转化的单菌落如何用菌液PCR检测? 构建酵母表达载体,目的基因来自植物体,可以含有启动子,内含子,构建酵母表达载体,目的基因来自植物体.请问可以用直接提取DNA,设计引物pcr扩增得到的基因片段来连接转化吗?目的基因里可 我的目的片段连载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR,没有条带. 酶切不出来,是怎么回事?转化涂板挑菌后,摇菌6-8h后,我用先前目的片段的引物,做了个菌液PCR,电泳后表明目的片段从菌液中扩出来了,这个应该说明目的片段连接到载体中了的,但我提出质粒后, 菌落PCR阳性,目的片段2300bp,假阴性可能性很小,但是我取菌涂板子后,竟然没长出来,这是不是说明质粒跑到菌液去了?取菌扩大培养又可以明显看到菌扩增了? 利用PCR技术扩增目的基本因,其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）图中引物中为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础.从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占比例为 农杆菌转化后摇菌的问题我的农杆菌是抗羧苄和氯霉素的,转化进的质粒是抗卡那的,那么在冻融法转化后涂板时用什么抗生素呢,只用卡那还是三种都加上吗?长出单菌落后再用什么抗生素摇菌 菌株菌粉可以直接做菌落PCR么?购买的标准菌株粉末可以直接至于50ulTE溶液,95度热处理5分钟,作为PCR模板么?为什么我扩增不出来目的片段呢?是因为革兰氏阳性菌的细胞壁太厚么?如果是我应该 PCR 产生比目的片段小的片段,这是怎么回事,怎么样处理?PCR扩增时,电泳后发现的得到的片段远远小于目的片段.目的片段曾今扩增出来过?这是什么原因,怎么样处理 . pcr扩增目的片段时,在第几个循环后才能出现目的片段长度的双链DNA分子? 为什么基因链接好做完转化之后长出来的菌落做PCR验证没有结果呢,扩增不出来? 菌落pcr假阳性如图,菌落pcr,2-6道扩增0.9kb目的条带,7-12扩增1.0kb目的条带.7,8道扩增的1.0kb有点偏离,9道为非特异性扩增,12道在1.0kb位置有隐约条带,是否为非特异性扩增?mark跑直线,而条带两端上扬 转化pET32a一个菌落也不长是什么原因啊我在做分子克隆,克隆了四个片段,要在pET32a载体上表达,可是酶切,连接,转化大肠杆菌BL21以后一个菌落也不长,我已经试过各种载体和目的片段的比例,而 T载体连接问题现在在做5,RACE.扩增出目的条带后胶回收,然后用特异性引物去嵌套验证,结果也有目的大小的条带扩增出来,这应该可以说明胶回收的目的片段是正确的.但是用T载体连接后转化到 大家好,问一个不能等到台面上的问题：目的基因片段是扩增片段吗?什么是RT-PCR的目的基因片段,谢谢