荧光定量PCR引物和探针怎么设计?
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2025/02/07 04:25:01
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使用引物设计软件,如果可以最好找公司设计合成,这样有保证.
有专门设计引物的网站，可以查查。和普通引物的主要区别在于扩增片段长度在80-300bp，其他都差不多。引物特异性要好，不能有引物二聚体，可以拿到引物后在Realtime PCR仪上做一次，看看峰型怎样，有没有二聚体峰和非特异峰。此外，还要保证内参和目的基因的扩增效率要一致，这点可以在Realtime PCR仪上做个效率验证试验。...
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有专门设计引物的网站，可以查查。和普通引物的主要区别在于扩增片段长度在80-300bp，其他都差不多。引物特异性要好，不能有引物二聚体，可以拿到引物后在Realtime PCR仪上做一次，看看峰型怎样，有没有二聚体峰和非特异峰。此外，还要保证内参和目的基因的扩增效率要一致，这点可以在Realtime PCR仪上做个效率验证试验。
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http://frodo.wi.mit.edu/ 网页的话常用这个。也可以用软件：primer primer5.0 。
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