请问PCR引物怎么设计
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2025/02/08 06:03:55
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请问PCR引物怎么设计
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请问PCR引物怎么设计
普通PCR规则:
1、18-25 bp;2、Tm值在45-60;3、2个引物之间没有超过5bp的互补序列;4、CG%在40-60%;5、避免连续出现3个以上的CCC或GGG;6、不要迷信百度.
一般都用软件设计。目前比较好,且免费的:
http://www.bioinformatics.nl/cgi-bin/primer3plus/primer3plus.cgi
输入你的DNA序列,用下方标明的符号注释你的序列后就可以设计引物了
这个主要是看你合成引物的目的是什么,如果只是普通的PCR,就不需要HPLC纯化,选择OPC或PAGE的方法就可以了。一般在用于多重PCR或定量PCR、点突变或克隆、反义DNA修饰或标记DNA以及化学或物理应用才需要用到HPLC纯化。
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