PCR中引物如何设计,

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2024/12/22 16:32:31

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一、可以使用oligo 6 或者primer5 等软件设计.用这些软件选择引物,主要就是看引物的稳定性,形成二聚体的可能性,退火温度等等参数.
二、如果你的序列同源性不高,GC含量也还可以的话,可以使用一些经验性原则.比如
1. 寡核苷酸链退火温度用经验公式2x(A+T)+4x(G+C）,一般用58度.不一定非是58
度,但用58度往往可以找到比较合适的序列.
2. 长度在18-21bases左右.
3. C、G含量40%-60%,分布比较均匀.
4. 3’端最后一个碱基最好是G或C,末尾不要有连续的GC.
5. 两条引物不会形成二聚体.
6. 单个引物不形成发夹结构.等等
这些原则在分子生物学书上有详细的介绍.

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