pcr时如何进行上下游的引物设计?

pcr时如何进行上下游的引物设计? 如何进行pcr引物设计? 在进行PCR实验扩增时如何设计引物?为什么要用引物?原理是什么? microRNA茎环引物及PCR上下游引物设计和扩增原理我在文献上看到一些用茎环引物反转录microRNA时,接下来的PCR的上游引物是包含了microRNA的5‘端一部分序列,而下游通用引物则为茎环上的一部分 PCR扩增基因设计引物时,用Primer5检测上游引物和下游引物的互补性,显示free energy= 1.50 Kcal/mol这样的引物可用吗? 为什么PCR引物设计中引物可以不从扩增序列两头开始?不从两头开始能得到上下游引物以外的序列吗? 反转录PCR引物如何设计?已经得到cDNA第一链,引物设计是以cdna为模版,设计上下游引物吗?cDNA不是只有一条链吗,是不是只需要一条引物?求详解. 如何进行引物的设计? 我有上下游引物,如何知道我扩增出来的序列是什么?E-PCR是不是可以实现这个功能?我设计了 人源的AKT1引物看能否用来扩增小鼠的AKT1 PCR中引物如何设计, 巢氏PCR引物如何设计? 巢氏PCR引物如何设计? PCR时引物的概念包括加进去的酶切位点和保护碱基嘛?算进引物的长度吗?一块分析嘛?我设计的下游引物只有15个碱基,但primer5上的长度18个,如果我删去三个就不配对了（只是下游引物）,影响 PCR的引物怎样设计, rt pcr的引物设计 如何进行引物设计! 做梯度PCR时,设置梯度值一般怎么结合上下游引物设?怎么让跑出的条带更特异?我一般能详细点回答更好了.我一般都是以上下游引物中最低的那个开始设,2度一个梯度,这次设计的引物特异性不 设计PCR引物时 下游引物按互补配对出现 TAG 可以吗? TAG不是终止密码子吗?