求CTAB的配方

来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/15 20:57:38
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求CTAB的配方
求CTAB的配方

求CTAB的配方
提取DNA配方
CTAB为十六烷基三甲基溴化铵,
CTAB提取缓冲液的经典配方
Tris-HCl (pH8.0)提供一个缓冲环境,防止核酸被破坏；
EDTA螯合Mg2+或Mn2+离子,抑制DNase活性；
NaCl 提供一个高盐环境,使DNP充分溶解,存在于液相中；
Cβ-巯基乙醇是抗氧化剂,有效地防止酚氧化成醌,避免褐变,使酚容易去除基因组DNA.
CTAB 4g
NaCl 16.364 g
1M Tris-HCl 20ml( PH8.0)
0.5M EDTA 8ml,先用70ml ddH2O溶解,再定容至200ml灭菌
冷却后0.2-1% 2-巯基乙醇（400ul）氯仿-异戊醇（24：1）：先加96ml氯仿,再加4ml异戊醇,摇匀即可.
提取RNA配方
2% CTAB（W/V）
2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP（W/V）
100 mM Tris-HCl（pH8.0,DEPC处理的水配置）
25mM EDTA
0.5g/L 亚精胺Spermidine
2.0M NaCl,2%巯基乙醇（V/V,使用前加入）
由于在高温灭菌条件下,Tris-HCl要和DEPC发生反应,所以配RNA提取缓冲液时直接用DEPC 处理的水配制即可.

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