DNA测序为什么要克隆到载体上去 而不直接测呢

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/25 22:33:28
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DNA测序为什么要克隆到载体上去 而不直接测呢
DNA测序为什么要克隆到载体上去 而不直接测呢

DNA测序为什么要克隆到载体上去 而不直接测呢
因为技术达不到啊,如果技术上可行的话,完全可以在染色体水平上进行DNA测序;
主要难点在于DNA实在太长了,序列太多了;
因而人们要避开这一点,所以就想到了把DNA分解成片断来操作;
但是该怎么分解,毕竟单独把一条染色体分解成小的DNA片断也是不合适的,因为DNA含量太小,太难操作;因此,既要保证DNA片断小,又要保证一定的DNA片断浓度.
所以,派拉蒙公司发明了一种方法,即取得细胞样品后,提取细胞中的染色体DNA,利用基因枪等等方法把DNA打碎,这样就保证了DNA片断的小以及浓度的高.
然后把这些DNA片断连到载体上,而这些DNA片断连到载体上的部位的载体序列(拗口)是已知的,因此,人们可以测出与载体相连的DNA片断的边缘序列是什么,从而使这些不同的DNA片断可以连在一起;同时,DNA片断的内部序列可以在又一轮的打断、连到载体上后进行测序,直到完全测出.
直到最后,所有的序列都被测出.这是一项大工程,需要一个大数据库,
由大化小,又由小得大,妙啊.
所以说DNA测序克隆到载体上是为了解决大片断DNA难以直接测定的问题,毕竟一次测定的DNA序列长度是有限的.
就这些,

一个是纯化和扩大培养,一个就是为了获得想要的dna片段,弄清序列

DNA测序为什么要克隆到载体上去 而不直接测呢 关于原核表达基因测序问题原核表达基因克隆时,为什么非要先克隆到中间载体上测序,而不是直接到表达载体,拿表达载体测序呢?希望大侠们不吝赐教啊! DNA分子克隆与PCR扩增DNA的区别T载体是克隆载体,能把目的基因片段转染到大肠杆菌扩增,但不表达.我新手弱弱的问一句为什么不直接把目的片段拿去跑PCR就行了,干嘛要用克隆载体去获得大量 为什么构建克隆载体不需T4连接酶为什么PCR扩增出的DNA片段和克隆载体pMD 18-T连接不需T4连接酶,而和表达载体连接就需要T4连接酶. 为什么pcr扩增后不直接进入表达载体,而要经过克隆载体呢?关键原因是什么呢? 为什么克隆载体MIX里有T4酶,而表达载体的MIX不含T4酶应该都可以混到mix里的,表达载体是什么原因没把T4酶混进去呢? 为什么克隆载体MIX里有T4酶,而表达载体的MIX不含T4酶应该都可以混到mix里的,表达载体是什么原因没把T4酶混进去呢? 基因工程为何要先构建克隆载体然后后构建表达载体能否在获得cDNA后直接连到表达载体上 T载体克隆为什么要用cDNA 为什么要先构建克隆载体再用表达载体 为什么要进行亚克隆?一个基因已经克隆到T载体上了,想表达它,为什么还要进行亚克隆,连到pET40b呢 转基因为什么不能直接用PCR产物连接在表达载体上?我在做小麦转基因到拟南芥中,今天在想为什么不能把目标基因PCR后直接表达载体构建,而要用克隆载体后再构建表达载体? 在基因工程研究和应用中,为什么必须使用载体来克隆外源DNA片断? 基因克隆操作中为什么要用到载体? T载体的作用是什么?克隆时为什么要用T载体? 请问,把PCR产物拿去生物公司测序的问题是不是也是先要将PCR产物DNA连到载体上,再用载体的通用引物测序?应该不是吧……这个应该属于克隆测序吧?PCR产物直接测序是否就是直接用你给他的引 DNA克隆载体有哪些重要结构元件 在基因工程研究和应用中,为什么必须使用载体来克隆外源DNA片段?详细一点