做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因啊?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/23 01:18:27
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做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因啊?
内参的选择:普通PCR内参的大小没有多大要求,但real time一般选择300bp以下 它的作用在于你提取的RNA逆转录成cDNA时,加入的浓度可能会不一致,即使用分光广度计测其浓度,也会有仪器误差.PCR时,每个标本都要做对应的内参,而且每次都要做,跑出的条带进行灰度分析,用目的基因的积分光密度比上内参的光密度就是你这个基因实际表达的量.你可以去生物帮那里了解.那里面向生物研究者、企业和研究机构,提供最新、领先、精准、高效、全面的生物产品和技术信息.1.物种:拟南芥(arabidopsis)或maize 2.基因名称:18S rRNA 3.模板:cDNA 4.PCR类型及目的:RT-PCR 5.Forward primer (5’-3’):CCATAAACGATGCCGGA Reverse primer (5’-3’):CACCACCCATAGAATCAAGA Probe:无 6.产物长度(bp):350 7.引物浓度:50 pmol/ul 8.退火温度:54.1 9.所用仪器:PE-9600 10.提交者ID:yuxing955 11.参考文献原文:本人亲自验证,还有本实验室其他人亲自验证.please click to connect www.bio1000.com/zt/dna/225764.html .hope that i can help you 1.物种:maize 2.基因名称:actin 3.模板:cDNA 4.PCR类型及目的:RT-PCR 5.Forward primer (5’-3’):AAATGACGCAGATTATGTTTGA Reverse primer (5’-3’):GCTCGTAGTGAGGGAGTACC Probe:无 6.产物长度(bp):7.引物浓度:50 pmol/ul 8.退火温度:54.1 9.所用仪器:PE-9600 10.提交者ID:yuxing955 11.参考文献原文:本人亲自验证,还有本实验室其他人亲自验证 你可以去生物帮自己查找一下啊,

做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因啊? 做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 RT-PCR是,内参是什么时候加入,作用是什么?谢谢 反转录RT-PCR的内参如何选择? 请问,GAPDH作为RT-PCR内参的原理是什么呀?我知道为什用它做内参了,就是不清楚怎么用它, 我要做CTGF和BMP-7的反转录RT-PCR,引物如何设计?内参怎么选择?GAPDH和b-actin哪个能用? 用18s rRNA做RT-PCR的内参时,可以用oligo dT做反转录吗? 怎样摸索PCR条件我做的 RT-PCR 以内参为对照进行条件摸索 但是就是P出不来条带 我做的RT-PCR怎么样让内参一致?刚入门 老板让做内参的条件 反复做也没有要P出来的目的条带 我的退火温度是55 可以的 但是用这个条件去P 其他的样就P不出来 应该怎么办? 做RT-PCR的目的是什么? RT PCR只跑出内参的条带,没有目的基因,原因有哪些? 为什么我的RT-PCR内参跑不出来.目的条带到是跑出来了 求助水稻的actin 内参基因引物想用水稻的内参做荧光定量PCR,有哪位大侠有水稻内参Actin的引物么?在下感激不尽! rp49基因是什么基因,很多做半定量PCR的用这个基因做内参,想了解下该基因是否是rRNA RT-PCR电泳照片做RT-PCR跑电泳时,只在一个孔中单独加了内参,其他孔中分别加了marker和目的基因,这样的照片发表文章时行吗?看其他人的电泳照片内参的亮度都是一样的,我就只单独加了一个内 做RT-PCR时,上下引物退火温度一定要一样吗?内参条带很亮,为什么没有目的基因? RT-PCR中内参蛋白GAPDH和b-actin人和小鼠的可以用同一对引物吗?最近在做RT-PCR实验,所用细胞有人肿瘤细胞和小鼠巨噬细胞,请问内参蛋白GAPDH和b-actin在这两种细胞中扩增可以选用同一对引物吗? RT PCR为何都要跑电泳,在PCR的时候为何要加内参?是为了判断是否是PCR过程中出现问题?内参跑不出来而cDNA能跑出来是怎么回事,相反又是怎么回事?