镍离子亲和柱纯化蛋白的洗脱液和平衡液怎么配?我第一次做蛋白,请尽量说详细点我手上只有一个笔记,是这样写的平衡液:50mM 磷酸钠 300mM氯化钠洗脱液:150mM咪唑具体的洗脱的步骤都有,1.平
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/29 11:28:50
镍离子亲和柱纯化蛋白的洗脱液和平衡液怎么配?我第一次做蛋白,请尽量说详细点我手上只有一个笔记,是这样写的平衡液:50mM磷酸钠300mM氯化钠洗脱液:150mM咪唑具体的洗脱的步骤都有,1.平镍离子亲
镍离子亲和柱纯化蛋白的洗脱液和平衡液怎么配?我第一次做蛋白,请尽量说详细点我手上只有一个笔记,是这样写的平衡液:50mM 磷酸钠 300mM氯化钠洗脱液:150mM咪唑具体的洗脱的步骤都有,1.平
镍离子亲和柱纯化蛋白的洗脱液和平衡液怎么配?
我第一次做蛋白,请尽量说详细点
我手上只有一个笔记,是这样写的
平衡液:50mM 磷酸钠
300mM氯化钠
洗脱液:150mM咪唑
具体的洗脱的步骤都有,
1.平衡液只有这两种成分这么简单吗?
2.洗脱液是水加咪唑还是平衡液加咪唑呢?
镍离子亲和柱纯化蛋白的洗脱液和平衡液怎么配?我第一次做蛋白,请尽量说详细点我手上只有一个笔记,是这样写的平衡液:50mM 磷酸钠 300mM氯化钠洗脱液:150mM咪唑具体的洗脱的步骤都有,1.平
1.平衡液是缓冲液,应该是PB或PBS,这个配方很多手册可以查,注意亲和层析的pH是一个比较重要的参数,会影响洗脱过程的,有一种镍柱洗脱方法就是高pH上样,低pH洗脱.
2.洗脱液一般是平衡Buffer中加入咪唑,没有缓冲的体系有可能造成蛋白的变性.
显然不可能是这样的配方。。。
参考Proteintech group公司的protocol吧:
http://www.ptglab.com/blog/wp-content/uploads/2010/08/Affinity-purification-of-soluble-His-tagged-proteins1.pdf
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