Tris-平衡酚是什么东西啊就是提取DNA时候用的,有知道德朋友详细点说说,把积分送给你.

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/25 16:33:54
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Tris-平衡酚是什么东西啊
就是提取DNA时候用的,有知道德朋友详细点说说,把积分送给你.

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核酸裂解液.苯酚用水饱和的目的是使其抽提DNA过程中,不致吸收样品中含有DNA的水分,减少DNA的损失.用Tris调节至pH为8是因为DNA在此条件下比较稳定.在中性或碱性条件下(pH5~7),RNA比DNA更容易游离到水相,所以可获得RNA含量较少的DNA样品.保存在冰箱中的酚,容易被空气氧化而变成粉红色的,这样的酚容易降解DNA,一般不可以便用.为了防止酚的氧化,可加入疏基乙醇和8-羟基喹琳至终浓度为0.1%.8-羟基喹琳是带有淡黄色的固体粉末,不仅能抗氧化,并在一定程度上能抑制DNase的活性,它是金属离子的弱螯合剂.用Tris pH8.0水溶液饱和后的酚,最好分装在棕色小试剂瓶里,上面盖一层Tris水溶液或TE缓冲液,隔绝空气,以装满盖紧盖子为宜,如有可能,可充氮气,防止与空气接触而被氧化.平时保存在4℃或-20℃冰箱中,使用时,打开盖子吸取后迅速加盖,这样可使酚不变质,可用数月.
自己配很麻烦,毒性也大.试剂公司都有卖,200ml只要50块,提200个样没问题.

这里应该分开解释。Tris是一种,酚是一种。
Tris的解释见百度百科。这个酚,待我回家查看分子生物学再告诉你。

Tris饱和酚一般PH大于7.8,用于DNA的提取。
Tris饱和酚:1、冰箱取出重蒸酚,室温放置---68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂
加8-羟基喹啉至0.1%和β-巯基乙醇至0.2%,(原液14. 4MOL/ML),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也可在烧杯中进行)
加入等溶剂的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放...

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Tris饱和酚一般PH大于7.8,用于DNA的提取。
Tris饱和酚:1、冰箱取出重蒸酚,室温放置---68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂
加8-羟基喹啉至0.1%和β-巯基乙醇至0.2%,(原液14. 4MOL/ML),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也可在烧杯中进行)
加入等溶剂的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放出下层黄色酚液,弃上层
加固体Tris约1g/100ml酚,摇匀,去水相
加0.1MOL/MLTris(PH8.0)平衡数次,至PH为8.0
加0.1MOL/MLTris(PH8.0)于棕色瓶中4度保存
如黄色消失或呈粉红色,则不能使用

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