tris饱和酚的作用是什么
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/26 16:17:54
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Tris饱和酚一般PH大于7.8,用于DNA的提取.其中,酚是强的蛋白变性剂,可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出.而Tris的主要作用是防治止酚类氧化,若酚类氧化,则会形成醌(两个苯环),醌含有强自由基,会破坏核酸结构.同时,由于PH值大于7,在碱性环境中DNA处于水相,RNA处于有机相.从而分离上清,即可得到DNA.\x0dTris饱和酚的配置:\x0d1、冰箱取出重蒸酚,室温放置---68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂\x0d2、加8-羟基喹啉至0.1%和β-巯基乙醇至0.2%,(原液14.4MOL/ML),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也可在烧杯中进行)\x0d3、加入等溶剂的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放出下层黄色酚液,弃上层\x0d4、加固体Tris约1g/100ml酚,摇匀,去水相\x0d5、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)平衡数次,至PH为8.0\x0d6、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)于棕色瓶中4度保存\x0d7、如黄色消失或呈粉红色(说明酚已经被氧化),则不能使用
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