测定霉菌时,为什么要选择菌落数在10~150之间的平皿?
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/26 23:45:26
测定霉菌时,为什么要选择菌落数在10~150之间的平皿?
测定霉菌时,为什么要选择菌落数在10~150之间的平皿?
测定霉菌时,为什么要选择菌落数在10~150之间的平皿?
霉菌和酵母计数操作细则
1 设备和材料
1.1 温箱：25～28℃.
1.2 振荡器.
1.3 天平.
1.4 显微镜.
1.5 玻塞三角瓶：300mL.
1.6 试管：15mm×150mm.
1.7 平皿：直径9cm.
1.8 吸管：1mL及10mL.
1.9 酒精灯.
1.10 载物玻片.
1.11 盖玻片.
1.12 广口瓶.
1.13 牛皮纸袋：121℃灭菌20min.
1.14 金属勺、刀等.
1.15 试管架.
1.16 接种针.
1.17 橡皮乳头.
2 培养基和试剂
2.1 马铃薯－葡萄糖琼脂培养基,附加抗菌素,按GB 4789.28中4.79规定.
2.2 孟加拉红培养基：按GB 4789.28中4.81规定.
2.3 灭菌蒸馏水.
2.4 乙醇.
3 操作步骤
3.1 采样：取样时须特别注意样品的代表性和避免采样时的污染.首先准备好灭菌容器和采样工具,如灭菌牛皮纸袋或广口瓶,金属刀或勺等.在卫生学调查基础上,采取有代表性的样品.样品采集后应尽快检验,否则应将样品放在低温干燥处.
粮食(包括粮库贮粮,粮店或家庭小量存粮)样品的采集,可根据粮囤或粮垛的大小和类型,分层定点取样,一般可分三层五点,或分层随机采取不同点的样品,充分混合后,取500g左右送检.小量存粮可使用金属小勺采取上、中、下各部位的混合样品.
谷物加工制品(包括熟饭、糕点、面包等)、发酵食品、乳及乳制品以及其他液体食品,用灭菌工具采集可疑霉变食品250g,装入灭菌容器内送检.
3.2 以无菌操作称取检样25g(或25mL),放人含有225mL灭菌水的玻塞三角瓶中,振摇30min,即为1：10稀释液.
3.3 用灭菌吸管吸取1∶10稀释液10mL,注入试管中,另用带橡皮乳头的1mL灭菌吸管反复吹吸50次,使霉菌孢子充分散开.
3.4 取1mL1∶10稀释液注入含有9mL灭菌水的试管中,另换一支1mL灭菌吸管吹吸5次,此液为1∶100稀释液.
3.5 按上述操作顺序做10倍递增稀释液,每稀释一次,换用一支1mL灭菌吸管,根据对样品污染情况的估计,选择3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿,然后将凉至45℃左右的培养基注入平皿中,待琼脂凝固后,倒置于25～28℃温箱中,3d后开始观察,共培养观察5d.
3.6 计算方法：通常选择菌落数在10～150之间的平皿进行计数,同稀释度的2个平皿的菌落平均数乘以稀释倍数,即为每克(或毫升)检样中所含霉菌和酵母数.
3.7 报告：每克(或毫升)食品所含霉菌和酵母数以个/g(个/mL)表示.