谢谢您的热心回答!请问用通用引物扩增及通用引物测序,和我按文献所说的引物来扩增测序有什么不同?提取DNA后,用30pmol 引物264 (5' TGC ACA CAG GCC ACAAGG GA3',对应E.coli 16S rRNA 1046 至 1027),10 pmol 引

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/15 12:41:00
谢谢您的热心回答!请问用通用引物扩增及通用引物测序,和我按文献所说的引物来扩增测序有什么不同?提取DNA后,用30pmol引物264(5''TGCACACAGGCCACAAGGGA3'',对应E.coli

谢谢您的热心回答!请问用通用引物扩增及通用引物测序,和我按文献所说的引物来扩增测序有什么不同?提取DNA后,用30pmol 引物264 (5' TGC ACA CAG GCC ACAAGG GA3',对应E.coli 16S rRNA 1046 至 1027),10 pmol 引
谢谢您的热心回答!请问用通用引物扩增及通用引物测序,和我按文献所说的引物来扩增测序有什么不同?
提取DNA后,用30pmol 引物264 (5' TGC ACA CAG GCC ACAAGG GA3',对应E.coli 16S rRNA 1046 至 1027),10 pmol 引物285(5' GAG AGT TTG ATC CTG GCT CAG3‘;对E.coli 16S rRNA 9 至 30)扩增相当于1Kb碱基.测序引物即上面的244,259.请问一:这样的测序设计,测得是单向还是双向?是测得整个扩增的1Kb,还是仅扩增的这两个测序引物之间的序列?请问二:用通用扩增引物及通用测序引物可以吗?有什么不同?
测序引物244:5’CCCACGCTGCCTCCCGTAG3’.
259:5’TTTCAGAACAACGCGACAA3.分别对应E.coli16SrRNA的361~341和609—590位置

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一、单向还是双向的话根据你的需求来决定,1K的话一个反应基本也能测出一大半呢(700-800bp左右)如果你想得到全部的序列,那建议你测双向并且用你的那个测序引物(244,259)这样的话测出来的序列是从中间往两边走,两头的序列应该能测全.而如果用你扩增的引物测的话是从两头往中间走,并且你这个有1K,这样测的话可能两头的序列会测不全.
二、引物的话用扩增和测序的都可以,只要你设计的扩增引物没有什么特殊结构、过长或过短一般用来测序都没什么大问题

谢谢您的热心回答!请问用通用引物扩增及通用引物测序,和我按文献所说的引物来扩增测序有什么不同?提取DNA后,用30pmol 引物264 (5' TGC ACA CAG GCC ACAAGG GA3',对应E.coli 16S rRNA 1046 至 1027),10 pmol 引 TA克隆正反向测序结果都找不到扩增目的条带的引物(载体通用引物也找不到)TA克隆正反向测序结果都找不到扩增目的条带的引物(载体通用引物也找不到,互补序列都试了),请问这是空载 细菌的PCR扩增为什么要使用细菌基因的16SrDNA通用引物? 请问PCR扩增中加入引物有什么用? microRNA茎环引物及PCR上下游引物设计和扩增原理我在文献上看到一些用茎环引物反转录microRNA时,接下来的PCR的上游引物是包含了microRNA的5‘端一部分序列,而下游通用引物则为茎环上的一部分 我PCR产物大小141bp,纯化后,连接到pGEM-T载体克隆,使用M13通用引物,扩增片段长度是多少?我想知道假如用pGEM-T通用引物M13F 5'TGTAAAACGACGGCCAGT3'和M13 RV 5'CAGGAAACAGCTATGACC3'引物进行菌液PCR,扩增出的片段 菌落PCR技术鉴定阳性重组菌落PCR扩增的序列是环状的质粒,还是线性的质粒呢?那载体通用引物是什么呢?用它扩增的是哪段序列呢? 我做的是分子鉴定真菌,用的是通用引物ITS1和ITS4,pcr扩增后只有marker有条带,其他的都没有是什么原因.另外一个真菌能扩增出来条带 不同基因组用同一引物扩增的结果会怎样 同一基因用两对引物扩增的目的是什么 多重种类特异性PCR需要注意什么?请问多重种类特异性PCR与普通的PCR,在各因素用量上 有什么区别吗?为什么通用引物可以扩增出条带,特异性引物却没有扩增出条带?在此先谢过! 什么是上游引物和下游引物?麻烦再问一下:上下游引物是不是多用在多对引物的扩增中???谢谢 S rDNA基因的V3区引物与16SrDNA 基因序列的扩增采用细菌通用引物之间有什么区别呢? 扩昆虫的COII基因,用的是通用引物.请问通用引物的含义是什么?是否适用于昆虫的通用引物就能适应于所有昆虫就是说,SIMON提供的通用引物是如何来的?是不是他总结了好多昆虫那个基因的片 请问ISSR标记的引物是通用引物吗?本人要做披碱草属方面的ISSR标记,发我一些引物信息. 如何设计real-time PCR 引物请问我想设计一个基因的引物,既能扩增人类也能扩增小鼠的该基因,该如何操作呢? PCR的扩增基因的引物是什么 引物是如何扩增形成引物二聚体的?