转基因植物PCR检测,扩增条带比预期目的条带要大,对PCR扩增产物测序,结果与原序列比对同源性为60%,说明转基因植物PCR检测,扩增条带比预期目的条带大得多,对pCR扩增产物测序,返回结果为重复

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/21 21:51:19
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转基因植物PCR检测,扩增条带比预期目的条带大得多,对pCR扩增产物测序,返回结果为重复序列和杂合序列,将返回的重复序列和原目的序列比对结果为60%,将返回的杂合序列和原目的序列比对结果为33.5%,这些结果说明什么问题

转基因植物PCR检测,扩增条带比预期目的条带要大,对PCR扩增产物测序,结果与原序列比对同源性为60%,说明转基因植物PCR检测,扩增条带比预期目的条带大得多,对pCR扩增产物测序,返回结果为重复
1.先看下PCR电泳图里杂带多不多,若有的话很可能非特异性扩增了
2.若条带干净,仍然有可能存在非特异性扩增,引物特异性不高导致竞争结合
可将DNA直接酶切看是否能切出你的目标片段
3.序列比对结果不能只看相似度,手工找一下看相同的序列出现在哪里怎么分布的,重复序列相似度高的话可能是零散的相似区域,很有可能P出的片段不是你想要的东西,最好换引物再试.若是有大段片段一致,则有可能在转基因过程中出现问题,片段没有完全转入

说明PCR用的引物特异性不好,扩增过程中出现了非特异性扩增。

说明你的引物的特异性不好,测序的结果基本上都很准确,还有就是你的片段是多大的,用什么taq酶做的PCR,这个也很重要。

建议更换引物或者再优化反应条件,这个应该是有非特异条带造成的

朋友,建议跑下PAGE胶,因为琼脂糖胶的分辨率太低,先用PAGE,在确定无杂带的情况下,再跑琼脂糖胶回收产物,或采用其他方式回收,另外不知道您扩出的序列大小跟您的阳性对照是否一致呢(page精确检测)?希望对您有所帮助,一个做转基因小麦检测的网友(550465190)...

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朋友,建议跑下PAGE胶,因为琼脂糖胶的分辨率太低,先用PAGE,在确定无杂带的情况下,再跑琼脂糖胶回收产物,或采用其他方式回收,另外不知道您扩出的序列大小跟您的阳性对照是否一致呢(page精确检测)?希望对您有所帮助,一个做转基因小麦检测的网友(550465190)

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转基因植物PCR检测,扩增条带比预期目的条带要大,对PCR扩增产物测序,结果与原序列比对同源性为60%,说明转基因植物PCR检测,扩增条带比预期目的条带大得多,对pCR扩增产物测序,返回结果为重复 pcr扩增时出现多条带,目的条带很亮,多余的带比目的条带大,是怎么回事 检测血清的病毒为阴性,PCR确能扩增出目的条带,测序结果也对,是怎么回事? 菌液PCR不同条带将已扩增出来的993bp的cDNA与T载体连接,之后DH5α转化,涂平板,挑克隆!菌液PCR为何一组检测到750bp有条带,一组1000bp处有条带两种结果!1000bp条带处是我预期的条带!麻烦大师留下相 PCR预期目标条带大小 菌液pcr检测目的条带很明显但是有弱杂带是怎么回事 目的DNA PCR扩增产物电泳为什么两个条带亮度不同 请问谁有PCR扩增目的条带 连接 转化的具体步骤呀 PCR退火温度态度会导致扩增不出目的条带么? 关于转基因植株检测的问题我做的是大豆转基因,最近做检测,用328bp的引物做PCR时质粒很正常,可是基因组在328bp左右没有出现条带,而在700bp出现很亮的条带;用35S引物PCR,在目的条带那 PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常. 如何消除PCR的拖尾PCR扩增出来有目的条带,但是有拖尾,呈弥散片 关于PCR的问题:PCR如果目的基因扩增出来了是不是条带中的引物二聚体就没有了呀? PCR扩增不出来条带的原因? 菌落pcr假阳性如图,菌落pcr,2-6道扩增0.9kb目的条带,7-12扩增1.0kb目的条带.7,8道扩增的1.0kb有点偏离,9道为非特异性扩增,12道在1.0kb位置有隐约条带,是否为非特异性扩增?mark跑直线,而条带两端上扬 PCR产物为什么会出现100~200bp的条带我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后电泳图谱显示~750bp有较明显条带,很奇怪的就是100~200bp有 进行PCR扩增为什么扩不出目的片段?就连非特异性条带也没有,引物与模板分得清清楚楚 PCR结束后,凝胶电泳检测,发现与目的带不一致的条带,可能原因是什么