请问谁有PCR扩增目的条带 连接 转化的具体步骤呀

请问谁有PCR扩增目的条带 连接 转化的具体步骤呀 转化后PCR无条带把连接产物连接到T载体之后转化大肠杆菌,用连接产物片段上有而T载体上没有的Kana抗性进行筛选,有转化子长出.培养转化子后PCR,却扩增不出目的条带（即之前的连接产物,约3k 如何消除PCR的拖尾PCR扩增出来有目的条带,但是有拖尾,呈弥散片 菌液PCR不同条带将已扩增出来的993bp的cDNA与T载体连接,之后DH5α转化,涂平板,挑克隆!菌液PCR为何一组检测到750bp有条带,一组1000bp处有条带两种结果!1000bp条带处是我预期的条带!麻烦大师留下相 pcr扩增时出现多条带,目的条带很亮,多余的带比目的条带大,是怎么回事 菌落pcr假阳性如图,菌落pcr,2-6道扩增0.9kb目的条带,7-12扩增1.0kb目的条带.7,8道扩增的1.0kb有点偏离,9道为非特异性扩增,12道在1.0kb位置有隐约条带,是否为非特异性扩增?mark跑直线,而条带两端上扬 T载体连接问题现在在做5,RACE.扩增出目的条带后胶回收,然后用特异性引物去嵌套验证,结果也有目的大小的条带扩增出来,这应该可以说明胶回收的目的片段是正确的.但是用T载体连接后转化到 PCR扩增不出来条带的原因? 关于PCR的问题：PCR如果目的基因扩增出来了是不是条带中的引物二聚体就没有了呀? 对于一段有重复序列的片段如何扩增,只是一个基因的中间的部分序列,准备扩增做overlap.我在两端设计的无配对引物,无法扩增目的条带,不知对PCR 条件有什么要求? 检测血清的病毒为阴性,PCR确能扩增出目的条带,测序结果也对,是怎么回事? 请问若因为非特异扩增导致PCR产物弥散,理论上弥散带里是否应该包含目的条带?谢谢TT-TTPCR产物电泳弥散,因为退火温度为55,所以初步考虑是退火过低导致的非特异扩增.但小女子有一疑问,我的 PCR扩增产物电泳后显示的条带说明什么? PCR产物测序前做大肠杆菌连接转化的目的是什么? 为什么pcr扩增得到的目的基因不能直接用于连接反应 多重种类特异性PCR需要注意什么?请问多重种类特异性PCR与普通的PCR,在各因素用量上 有什么区别吗?为什么通用引物可以扩增出条带,特异性引物却没有扩增出条带?在此先谢过! PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带 PCR跑出的条带与目的条带不同怎么办