PCR产物测序前做大肠杆菌连接转化的目的是什么?

PCR产物测序前做大肠杆菌连接转化的目的是什么? 转化后PCR无条带把连接产物连接到T载体之后转化大肠杆菌,用连接产物片段上有而T载体上没有的Kana抗性进行筛选,有转化子长出.培养转化子后PCR,却扩增不出目的条带（即之前的连接产物,约3k 质粒转化大肠杆菌的目的? PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体+目的片段,那么转化挑克隆提取的质粒片段是多大?PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体的序列是大约3000bp,PCR产物的目的片段是450bp,那么：经过连接、转化后挑单克隆,提取质粒,提 如果PCR产物可以直接用来测序,但为什么还需要买PCR产物纯化试剂盒,还要进行连接转化提质粒酶切?我的实验是在PCR产物电泳后发现有自己所需要的长度的目的片段.如果直接测序和经过连接转 请问谁有PCR扩增目的条带 连接 转化的具体步骤呀 大肠杆菌转化后做菌落pcr一直p不出带是怎么回事?麻烦高手指教下pcr体系及反应时的程序,目的基因大概1000bp pcr后电泳的目的是?pcr 回收产物再做电泳的目的是? 我想问PCR连接产物如果不及时做转化?应该如何保存? PCR纯化产物与T载体连接后放置两天影响转化吗 如果将PCR扩增的X基因片段与克隆载体连接,并转化入宿主大肠杆菌中,写出技术路线（包括基因和载体的连接、转化和鉴定）和关键点. 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急加点 kml?但是我转化后菌落长的还可以啊.酶切目的带在1000左右,质粒PCR在750左右了 质粒与目的基因的连接产物是? 我在构建质粒：载体大小为9kb,目的片段为3.4kb,连接产物可以用普通的热击方法转化感受态Ecoli.DH5a吗? 转化到大肠杆菌中的质粒会甲基化吗?看到文献说大肠杆菌中的质粒会甲基化,那么用T载体与目的片段连接后转化到大肠杆菌中,会被甲基化吗?急, 如何验证载体质粒的酶切位点已被切开?PCR产物（目的基因）被酶切开? PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常. pcr产物不纯化直接酶切连接可以吗?PCR反应的buffer会不会对酶产生影响哦~