大肠杆菌转化后做菌落pcr一直p不出带是怎么回事?麻烦高手指教下pcr体系及反应时的程序,目的基因大概1000bp

大肠杆菌转化后做菌落pcr一直p不出带是怎么回事?麻烦高手指教下pcr体系及反应时的程序,目的基因大概1000bp 为什么每次做转化后菌落PCR有带,但是提质粒后就P不出. 菌落PCR有带,可提取的质粒没带!请问我转化的单菌落做菌落PCR有带,单相对应的菌落提取质粒P不出带是什么原因呀?引物是特异性的! 菌落PCR有关问题?我们做了转化实验,将转化后的菌涂在含Kan抗性的平板上,为什么挑取能生长的菌落做PCR没有目的条带? 革兰氏阳性菌PCR革兰氏阳性菌如何做菌落PCR?煮20 min后,还是不能P出目的条带. 转化大肠杆菌平板出现卫星菌落是怎么回事 怎样鉴定大肠杆菌质粒转化后获得的菌落是否为阳性? 转化的大肠杆菌菌落周围为什么长出好多小菌落我做的大肠杆菌转化,涂平板培养了二十几个小时,有的菌落外面有些小菌落,后来平板放在4度冰箱,几乎每个菌落周围都长出了很多的小菌落,是 质粒转化大肠杆菌后涂平板长出的菌落出现较规则的大小两种菌落 可以继续进行质粒提取吗? 我的片段转入ppicza载体后转化到DH5a里,菌落PCR验证成功,为何就是提不出质粒? 为什么基因链接好做完转化之后长出来的菌落做PCR验证没有结果呢,扩增不出来? PCR扩增得到产物后,重组载体,转入大肠杆菌,菌落培养,先是质粒提取后琼脂糖凝胶电泳,得到下面图谱,团长,这个图怎么分啊PCR扩增得到产物后,重组载体,转入大肠杆菌,菌落培养,先后经过氨苄 用氯化钙制备感受态细胞的做转化后一个菌落都张不出的原因 我是按照文献步骤做的呀1、 取大肠杆菌原始菌株（无外源质粒）单菌落接种于5mlLB培养液中,37℃,摇荡过夜；2、 取1ml过夜培养 单菌落菌液PCR检测请问转化的单菌落如何用菌液PCR检测? PCR产物测序前做大肠杆菌连接转化的目的是什么? 为什么大肠杆菌经过质粒转化后铺板后生长的菌落大小不一致,而且是有规律的出现两种大小不一样的形态. 转化后挑取含有目的片段的单菌落摇菌扩增以后划盘子,几天后挑取部分菌落做PCR无带,不知是何原因?划盘子后剩余的菌液提质粒测序结果与预期的片段相同，通用引物和自身引物开始都能得 大肠杆菌转化后长得很慢,提质粒跑电泳条带很淡我是用的一种基因缺陷性大肠杆菌做感受态,然后将连接好的质粒转入(连好的质粒里含有缺少的基因片段),涂平板以后需要24h才有菌落长出,挑