菌落PCR有关问题?我们做了转化实验,将转化后的菌涂在含Kan抗性的平板上,为什么挑取能生长的菌落做PCR没有目的条带?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/25 13:59:43
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菌落PCR有关问题?我们做了转化实验,将转化后的菌涂在含Kan抗性的平板上,为什么挑取能生长的菌落做PCR没有目的条带?
菌落PCR有关问题?
我们做了转化实验,将转化后的菌涂在含Kan抗性的平板上,为什么挑取能生长的菌落做PCR没有目的条带?

菌落PCR有关问题?我们做了转化实验,将转化后的菌涂在含Kan抗性的平板上,为什么挑取能生长的菌落做PCR没有目的条带?
这很正常,一般做蓝白斑挑斑会更精确,不过现在的连接酶成功率很高,不少已经达到90%以上,但仍然存在只转化了质粒而未连接成功目的条带的菌落.所以挑斑时一般要多挑几个,而且选单菌落,可以画圈圈分散开来挑斑.

菌落PCR有关问题?我们做了转化实验,将转化后的菌涂在含Kan抗性的平板上,为什么挑取能生长的菌落做PCR没有目的条带? 菌落PCR有带,可提取的质粒没带!请问我转化的单菌落做菌落PCR有带,单相对应的菌落提取质粒P不出带是什么原因呀?引物是特异性的! 为什么每次做转化后菌落PCR有带,但是提质粒后就P不出. 为什么基因链接好做完转化之后长出来的菌落做PCR验证没有结果呢,扩增不出来? 最近做了连接转化,挑平板上的菌落摇菌后提质粒,单酶切可以切开,而且质粒的大小明显小于空质粒然后用质粒稀释100倍后进行PCR,可以看到目的条带,但是有拖带.然后我继续将质粒稀释至500倍, 大肠杆菌转化后做菌落pcr一直p不出带是怎么回事?麻烦高手指教下pcr体系及反应时的程序,目的基因大概1000bp 加了甘油的菌液还可以摇起来接着做菌落PCR pcr电泳带看不清楚我们一共四个组做了这个实验,marker很清晰,就是我们的结果都没有或者是看不清,这是怎么回事,除了操作问题还能有什么问题~ 单菌落菌液PCR检测请问转化的单菌落如何用菌液PCR检测? 我们在牛奶实验中遇到了和你一样的问题,牛奶菌落实验中空白培养基为什么总是长菌,你是怎么解决的? 我们现在准备做菌落pcr,可以问一下你pcr时需不需要加石蜡油这种东西?还是其他物质啊. 菌落PCR怎么做有人用菌落做过PCR吗,假阳性高吗,效果怎么样啊 菌落PCR原理 革兰氏阳性菌菌落PCR问题我最近也在做菌落PCR验证,我是直接挑单菌落进行PCR验证的,但是电泳不出现条带,胶孔里有明亮物质,100bp处有很多模糊的亮色物,我是一个新手,还望您指教一下,我这种 转化的大肠杆菌菌落周围为什么长出好多小菌落我做的大肠杆菌转化,涂平板培养了二十几个小时,有的菌落外面有些小菌落,后来平板放在4度冰箱,几乎每个菌落周围都长出了很多的小菌落,是 有关生物的问题,怎么判断突变性基因?科学家分离了脉胞菌(真菌)的突变品系——poky小菌落,于野生型进行了下列杂交实验:1.poky小菌落♀x野生型♂→后代全部为poky小菌落;2.野生型♀x pok 菌落PCR做了10次还是不成功···我是第一次做菌落PCR,但是做了10次都没成功···用菌是JM83菌,在平板上培养成菌落的,做的时候就挑一点菌进体系中.我的体系是 mix 混合液(里面包含了dNTP、buff 请问real time PCR的试剂盒可以在普通的PCR仪做普通的PCR吗?那请问如果试剂盒已经是将荧光燃料加进去了的也可以做普通PCR吗?还有realtime的试剂盒里写了不同的机器实验样品的配制方法不同,