革兰氏阳性菌PCR革兰氏阳性菌如何做菌落PCR?煮20 min后,还是不能P出目的条带.

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/20 04:00:44
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革兰氏阳性菌PCR
革兰氏阳性菌如何做菌落PCR?煮20 min后,还是不能P出目的条带.

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取1ml菌液离心去培养基或者刮取少许菌苔,加入100μl无菌水混匀.EP管放入冷水中,然后开始加热,让菌液慢慢升到100℃,而不是在水已经沸腾的时候加入菌液去煮.沸腾开始后计时,十分钟后迅速放入-20℃冰箱,冷冻十分钟.取出菌液,融化后8000rpm离心1分钟,取上清作为PCR模板.因为煮沸的效率低,所以50μl的PCR体系模板最好加1.5μl-2μl.
我以前也是革兰氏阳性菌直接放入沸水煮结果P不出来,可能是因为细胞壁厚,突然受热后细菌表面形成变性层,反而保护了细菌的结构,类似于纯酒精不能消毒的原理吧.改进后都能P出来.希望对你能够有效.

革兰氏阳性菌PCR革兰氏阳性菌如何做菌落PCR?煮20 min后,还是不能P出目的条带. 什么是菌落pcr假阳性 革兰氏阳性菌菌落PCR问题我最近也在做菌落PCR验证,我是直接挑单菌落进行PCR验证的,但是电泳不出现条带,胶孔里有明亮物质,100bp处有很多模糊的亮色物,我是一个新手,还望您指教一下,我这种 什么是革兰氏阳性菌 菌落PCR怎么做有人用菌落做过PCR吗,假阳性高吗,效果怎么样啊 菌株菌粉可以直接做菌落PCR么?购买的标准菌株粉末可以直接至于50ulTE溶液,95度热处理5分钟,作为PCR模板么?为什么我扩增不出来目的片段呢?是因为革兰氏阳性菌的细胞壁太厚么?如果是我应该 革兰氏阳性菌对青霉素敏感机理? 革兰氏阳性菌包括那些具体细菌? 为什么青霉素不能消灭革兰氏阳性菌 为什么革兰氏阳性菌对溶菌酶敏感 关于菌落pcr我的做法是: 用枪头挑选单菌落到装有10uL水的pcr管中,然后悬浮菌液. 在做 PCR 时,吸取 2uL 做摸板,但电泳检测后,选有阳性克隆相对的菌液 8uL 与试管的液体培养基中培养.这样做, 您好!我想请问一下,如果使用菌落PCR的话,革兰氏阳性细菌会不会因为细胞壁很厚而P不出来呀? 用革兰氏阳性菌做菌落PCR时,怎样处理菌体模板?如题,本人刚刚开始做分子生物学方面的研究,因为大家都知道G+的胞壁比G-菌比如E.coli的要厚些,所以要在PCR之前要对模板进行一定的处理,但是怎 PCR DNA提取试剂盒使用问题我买的试剂盒说明书上面分别列出了革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的操作方法,而我做的目标菌种为产甲烷细菌,既有革兰氏阴性菌又有阳性菌,应该按照哪种方法处理 微生物检测中,做细菌霉菌检测时是否要做阳性菌的阳性对照 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁的构造 革兰氏阳性菌和阴性菌的区别? 光合细菌是革兰氏阳性菌还是革兰氏阴性菌?