PCR纯化产物与T载体连接后放置两天影响转化吗

PCR纯化产物与T载体连接后放置两天影响转化吗 PCR产物纯化后,连接载体PGMT,转化如DH5α后为何不能直接测序,还要再酶切和提取质粒呢? pcr产物不纯化直接酶切连接可以吗?PCR反应的buffer会不会对酶产生影响哦~ 转化后PCR无条带把连接产物连接到T载体之后转化大肠杆菌,用连接产物片段上有而T载体上没有的Kana抗性进行筛选,有转化子长出.培养转化子后PCR,却扩增不出目的条带（即之前的连接产物,约3k PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体+目的片段,那么转化挑克隆提取的质粒片段是多大?PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体的序列是大约3000bp,PCR产物的目的片段是450bp,那么：经过连接、转化后挑单克隆,提取质粒,提 我loading buffer直接加到PCR产物中了,不知道影不影响PCR产物直接纯化PCR产物出来后 直接加了loading buffer,然后取5ul走的电泳,剩余的PCR产物含有loading buffer,不知道能不能直接用PCR纯化试剂盒纯化,l 有的聚合酶在PCR产物的3,末端可以接上碱基A,易于与T载体连接,请问载体上的T碱基位于哪个末端?如果也位于3,端,似乎他们两个连不上啊 PCR产物一天会降解吗?回收能与T载体连上吗? 我PCR产物大小141bp,纯化后,连接到pGEM-T载体克隆,使用M13通用引物,扩增片段长度是多少?我想知道假如用pGEM-T通用引物M13F 5'TGTAAAACGACGGCCAGT3'和M13 RV 5'CAGGAAACAGCTATGACC3'引物进行菌液PCR,扩增出的片段 PCR纯化产物为什么能直接连接,什么情况下直接连接?求高手指教. 载体构建酶切位点的问题18—T克隆载体与目的基因连接后,送去测序,Blast之后得到序列,上面含有下一步的酶切位点,请问,目的基因序列包括酶切位点序列吗,师姐说不包括.酶切位点是PCR时加入 我们机构想使用博凌科为的pSURE-T 载体连接试剂盒,据说可以简化PCR产物的克隆,用过的给我介绍下 t载体连接产物4度可以保存3天吗 缺了起始密码子“ATG”的一段基因在转入表达载体之后表达出的产物在功能上有没有影响?由于种种原因,PCR后缺失了“ATG”,请问如果转入表达载体表达之后,产物与正常的表达有没有什么区别 乳杆菌16srDNA序列分析 先提取DNA然后PCR,扩增后纯化一下直接送去测序还是需要载体连接后才能送去测序?2者有什么区别 转基因为什么不能直接用PCR产物连接在表达载体上?我在做小麦转基因到拟南芥中,今天在想为什么不能把目标基因PCR后直接表达载体构建,而要用克隆载体后再构建表达载体? 以pcr产物为模板 进行测序pcr NaAc edta 无水乙醇纯化后有很多白色沉淀 为什么? 如果PCR产物可以直接用来测序,但为什么还需要买PCR产物纯化试剂盒,还要进行连接转化提质粒酶切?我的实验是在PCR产物电泳后发现有自己所需要的长度的目的片段.如果直接测序和经过连接转