PCR产物纯化后,连接载体PGMT,转化如DH5α后为何不能直接测序,还要再酶切和提取质粒呢?

PCR产物纯化后,连接载体PGMT,转化如DH5α后为何不能直接测序,还要再酶切和提取质粒呢? PCR纯化产物与T载体连接后放置两天影响转化吗 转化后PCR无条带把连接产物连接到T载体之后转化大肠杆菌,用连接产物片段上有而T载体上没有的Kana抗性进行筛选,有转化子长出.培养转化子后PCR,却扩增不出目的条带（即之前的连接产物,约3k PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体+目的片段,那么转化挑克隆提取的质粒片段是多大?PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体的序列是大约3000bp,PCR产物的目的片段是450bp,那么：经过连接、转化后挑单克隆,提取质粒,提 如果PCR产物可以直接用来测序,但为什么还需要买PCR产物纯化试剂盒,还要进行连接转化提质粒酶切?我的实验是在PCR产物电泳后发现有自己所需要的长度的目的片段.如果直接测序和经过连接转 PCR纯化产物为什么能直接连接,什么情况下直接连接?求高手指教. PCR产物测序前做大肠杆菌连接转化的目的是什么? pcr产物不纯化直接酶切连接可以吗?PCR反应的buffer会不会对酶产生影响哦~ 乳杆菌16srDNA序列分析 先提取DNA然后PCR,扩增后纯化一下直接送去测序还是需要载体连接后才能送去测序?2者有什么区别 转基因为什么不能直接用PCR产物连接在表达载体上?我在做小麦转基因到拟南芥中,今天在想为什么不能把目标基因PCR后直接表达载体构建,而要用克隆载体后再构建表达载体? 以pcr产物为模板 进行测序pcr NaAc edta 无水乙醇纯化后有很多白色沉淀 为什么? 我loading buffer直接加到PCR产物中了,不知道影不影响PCR产物直接纯化PCR产物出来后 直接加了loading buffer,然后取5ul走的电泳,剩余的PCR产物含有loading buffer,不知道能不能直接用PCR纯化试剂盒纯化,l 做基因多态性,PCR产物必须纯化后才能酶切吗我做人脂联素基因多态性,PCR产物后要用Hha Ⅰ做酶切,PCR产物一定要纯化后才能酶切吗?我看网上说要纯化,但打电话问大连宝工说可以不纯化直接酶 我PCR产物大小141bp,纯化后,连接到pGEM-T载体克隆,使用M13通用引物,扩增片段长度是多少?我想知道假如用pGEM-T通用引物M13F 5'TGTAAAACGACGGCCAGT3'和M13 RV 5'CAGGAAACAGCTATGACC3'引物进行菌液PCR,扩增出的片段 我想问PCR连接产物如果不及时做转化?应该如何保存? 载体与插入片段连接好后 进入宿主细胞转化 这个时候已经有了一次转化 为什么到后面又要转化呢?将载体与插入片段连接上之后,进入到宿主细胞转化：A：200ul感受态细胞加入连接产物后 轻 我想克隆一个基因.先进行PCR,PCR产物纯化回收,然后连接,转化,一直不成功.回收的片段很亮.我用的是Ex TAQ,他的加A尾效率应该很高了,做T-A克隆应该没有问题,但就是不成功.我还做了平行试验,con 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急加点 kml?但是我转化后菌落长的还可以啊.酶切目的带在1000左右,质粒PCR在750左右了